Хотя ключевая позиция гиппокампа в процессах памяти не подвергается сомнению, специфика его участия в переработке информации далеко не установлена. Современные возможности нейровизуализации позволяют оперировать точными морфометрическими показателями. Цель исследования - изучение тонких перестроек мнестической функции в условиях механического воздействия на гиппокамп со стороны объемного новообразования и лучевого воздействия в ходе проводимой терапии. Материалы и методы. Исследовалась однородная выборка из 28 пациентов с менингиомами хиазмально-селлярной области, прилежащими к гиппокампу. У 10 больных (5 - с левосторонним расположением менингиомы и 5 - с правосторонним) опухоль находилась рядом с гиппокампом, но не оказывала на него механического воздействия. У 18 больных (10 - с левосторонним расположением менингиомы и 8 - с правосторонним) патологическое новообразование сдавливало гиппокамп на стороне расположения. Контрольную группу составили 39 здоровых испытуемых. Все группы были сопоставимы по возрасту, образованию и гендерным характеристикам. С целью остановки роста опухоли больные проходили лучевую терапию, при которой гиппокамп вынужденно получал дозу, сопоставимую с дозой в опухоли (30 сеансов с разовой очаговой дозой 1,8 Гр, суммарной - 54,0 Гр). На основании данных литературы об участии гиппокампа в мнестических процессах была разработана специальная методика исследования памяти. Ошибочные ответы, которые испытуемые допускали при опознавании ранее запоминавшихся изображений, были классифицированы как нивелирующие фактор новизны опознаваемого стимула или как ошибочно акцентирующие его новизну. Результаты. В первой точке наблюдения (перед началом лучевой терапии) все группы прошли полное стандартизированное нейропсихологическое исследование и выполнили батарею когнитивных тестов. Общая результативность тестов, оценивающих внимание, память, процессы мышления, нейродинамические показатели, соответствовала нормативным показателям. Мягкое компримирующее воздействие опухоли, не вызывающее разрушений макроструктур мозга, не сопровождалось очаговыми нейропсихологическими симптомами и дефицитарными проявлениями в когнитивной сфере. Однако уже в первой точке наблюдения число ошибок pattern separation в клинической группе значимо превышало таковое у здоровых испытуемых. Вторая точка наблюдения (сразу после лучевой терапии) и третья точка наблюдения - через 6 мес после лечения - показали, что состояние когнитивной сферы пациентов в целом не ухудшается, а по ряду параметров характеризуется положительной динамикой, что может быть обусловлено некоторым уменьшением объема опухоли после проведенного лечения. Однако распределение ошибок в оригинальной методике значимо изменилось. При узнавании ранее запоминавшихся стимулов ошибки, нивелирующие фактор новизны оцениваемого стимула, нарастали, а ошибок с переоценкой новизны стимулов становилось меньше. Все тенденции, гипотетически (по данным литературы) соотносимые с изменением функциональной активности гиппокампа, были более выражены в подгруппе больных с механическим воздействием опухоли на эту структуру. Заключение. Непрерывный поток впечатлений, сопровождающий человека в любой момент его активного бодрствования, по всей вероятности маркируется гиппокампом в континууме «старый-похожий-новый». Проведенное исследование показало, что механическое воздействие на гиппокамп в сочетании с лучевой нагрузкой меняет спектр оценок в сторону преобладания маркировки «старый, ранее виденный, уже знакомый».
Современные технологии в медицине
2021. — Выпуск 4
Содержание:
Цель исследования - оценка характера течения COVID-19 в зависимости от пола у пациентов моложе 55 лет. Материалы и методы. В перепрофилированном инфекционном стационаре Приволжского исследовательского медицинского университета проведено пилотное одноцентровое сплошное ретроспективное нерандомизированное исследование, критерием включения в которое служил возраст пациентов (до 55 лет) с подтвержденной коронавирусной инфекцией. В сформированных по гендерному признаку группах (25 мужчин, средний возраст - 44,0±7,8 года; 32 женщины, средний возраст - 41,9±9,1 года) изучали факторы осложненного течения COVID-19 (перевод в ОРИТ, рост объема поражения легких по данным КТ). Результаты. Течение COVID-19 у пациентов мужского пола моложе 55 лет было отягощено сопутствующими заболеваниями (γ=0,36; p=0,043), среди которых преобладали ИБС (γ=1,00; p=0,003) и заболевания печени (γ=0,58; p=0,007). Частотный анализ подтвердил большую распространенность ИБС у мужчин (p=0,044). Значимые различия между гендерными группами отмечены и в объемах поражения легких по данным КТ: при поступлении (р=0,050), в процессе лечения (р=0,019) и при выписке (p=0,044). Методом логистической регрессии установлена взаимосвязь между переводом в ОРИТ пациентов мужского пола моложе 55 лет с индексом Кребса [y= -2,033+1,154 мужской пол + 1,539 индекс Кребса (χ2=5,68; p=0,059)] и коморбидностью [y= -2,836+1,081 мужской пол + 2,052 коморбидность (χ2=7,03; p=0,030)]. Показано влияние индекса Кребса и мужского пола на рост объема поражения легких [y= -1,962+0,575 мужской пол + 1,915 индекс Кребса (χ2=7,78; p=0,021)]. Заключение. В течении COVID-19 у лиц в возрасте до 55 лет существенное значение имеет гендерная принадлежность: у мужчин отмечаются более выраженное поражение паренхимы легких и более значительное изменение лабораторных показателей. Факторами риска тяжелого течения COVID-19 у мужчин являются ИБС и патология гепатобилиарной системы. Расчет индекса Кребса может использоваться для оценки риска прогрессирования заболевания.
Ключевые слова
Цель исследования - оценить цитотоксическое влияние ксеноперикардиального биоматериала, обработанного ди- и пентаэпоксидами, на культуры клеток in vitro. Материалы и методы. Использованы образцы бычьего и свиного перикарда. Для консервации применяли три различных режима: 1) 0,625% раствор глутарового альдегида с двукратной сменой раствора на 2-е и 7-е сутки; 2) 5% раствор диглицидилового эфира этиленгликоля со сменой раствора на 2-е сутки; 3) 5% раствор диглицидилового эфира этиленгликоля в течение 10 дней, затем 2% раствор пентаэпоксида в течение 10 дней. Цитотоксичность биоматериала оценивали методом экстракции. Для определения цитотоксичности использовали клетки линии EА.hy926, мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки (ММСК), фибробласты. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью МТТ-теста, уровень апоптоза и некроза в культурах клеток - по окраске акридиновым оранжевым и этидиумом бромидом после культивирования с экстрактами ксеноперикарда с различными режимами консервации. Результаты. Установлено, что наибольшее токсическое влияние на культуры клеток оказывают экстракты бычьего и свиного перикардов, консервированных глутаровым альдегидом: жизнеспособность клеток снижается на 20-33%. Экстракты ксеноперикарда, консервированного ди- и пентаэпоксидными соединениями, не оказывают токсического влияния на эндотелиальные клетки, ММСК, фибробласты, поскольку жизнеспособность клеток снижается не более чем на 15%. Наименьший уровень апоптоза и некроза отмечается в культурах клеток под влиянием экстрактов перикардов, консервированных диэпоксидными и пентаэпоксидными соединениями. Заключение. По оценке цитотоксичности, определению уровня апоптоза и некроза в культурах клеток установлено, что бычий и свиной перикарды, обработанные ди- и пентаэпоксидами, не оказывают цитотоксического влияния на культуру эндотелиальных клеток линии EA.hy926, ММСК, фибробластов in vitro. В то же время глутаровый альдегид в сравнении с ди- и пентаэпоксидами оказывает токсическое влияние на клетки.
Ключевые слова
Цель исследования - оценить влияние хирургической техники на параметры микроциркуляции и микроструктуры в приводящем и отводящем концах кишки после ее экстренной резекции по поводу острой мезентериальной ишемии с помощью мультимодальной оптической когерентной томографии (ММ ОКТ). Материалы и методы. Исследование проведено на трех группах крыс-самцов линии Wistar массой 270-435 г (n=18). Всем животным моделировали острую окклюзивную артериальную ишемию тонкой кишки, через 80-90 мин резецировали ишемизированный нежизнеспособный участок кишки и завершали операцию выведением стомы (группа 1, n=6), наложением кисетных швов (группа 2, обструктивная резекция, n=6) или внутренним дренированием приводящего и отводящего концов тонкой кишки (группа 3, шунтирование, n=6). Через 2 сут выполняли релапаротомию и формирование анастомоза. С использованием метода ММ ОКТ на каждом этапе хирургического вмешательства изучали картину микроструктуры (слоев) кишечной стенки (в режиме кросс-поляризационной ОКТ) и интрамурального кровообращения (в режиме оптической когерентной ангиографии - ОКА) со стороны серозной оболочки. Данные ММ ОКТ, полученные в терминальных отделах кишечника сразу после резекции и через 2 сут (перед формированием анастомоза), сравнивали между исследуемыми группами, а также с данными до моделирования ишемии (норма). Все резецированные участки кишки подвергали гистологическому исследованию. Полученные ММ ОКТ-данные сопоставляли с результатами гистологического и прижизненного макроскопического исследования. Результаты. В ходе изучения микроструктуры кишечной стенки in vivo методом КП ОКТ установлено, что при стомировании (группа 1) и обструктивной резекции (группа 2) на КП ОКТ-изображениях наблюдались признаки отека тканей и деструктивных изменений в слизистой оболочке, подтвержденные гистологически, в то время как при шунтировании (группа 3) изменения по сравнению с нормой были минимальными. По данным ОКА было установлено, что на 2-е сутки при стомировании в приводящем и отводящем концах кишки произошло заметное выпадение большей части кровеносных сосудов мелкого и среднего диаметра, визуализировались в основном крупные артерии и вены. При обструктивной резекции (наложении кисетов) и шунтировании наиболее заметные изменения (уменьшение количества визуализируемых кровеносных сосудов) наблюдались в отводящем конце кишки. Динамика показателя L, рассчитанного по ОКА-изображениям и характеризующего общую длину интрамуральной перфузируемой сосудистой сети, показала статистически значимое снижение значений в культях кишки при стомировании: 12,18 [10,40; 14,20] мкм - в приводящем и 10,67 [7,98; 13,05] мкм - в отводящем отделах по сравнению со значениями показателя до ишемии - 18,90 [17,98; 19,73] и 18,74 [17,46; 19,90] мкм соответственно (p=0,0001). При обструктивной резекции (группа 2) статистически значимые различия в значениях параметра L обнаружены только для отводящего отдела кишки: 16,39 [12,37; 18,10] мкм по сравнению с показателем до ишемии - 18,74 [17,46; 19,90] мкм (p=0,041). После шунтирования (группа 3) статистически значимых изменений показателя L относительно нормы не произошло. Заключение. При использовании ММ ОКТ установлено, что хирургическая техника обработки культи кишки после ее экстренной резекции по поводу острой мезентериальной ишемии существенно меняет состояние тканей в период до наложения отсроченного анастомоза. Наименее выраженные и наиболее сбалансированные изменения происходят в приводящем и отводящем концах кишки в случае ее шунтирования. Однако для рекомендации преимущественно этого вида хирургической техники необходима разработка надежных, безопасных и эффективных инструментов шунтирования.
Ключевые слова
Цель исследования - получение конструкции на основе пластины хряща носовой перегородки, обеспечивающей нужную дифференцировку клеток в разных слоях для замещения глубокого остеохондрального дефекта; разработка алгоритма последовательности химических и физических воздействий для создания неиммуногенной, двухслойной пористой структуры с нужными упруго-механическими свойствами. Материалы и методы. Пластины из гиалинового хряща носовой перегородки свиньи, покрытые сверху надхрящницей, подвергались многостадийной обработке, включающей заморозку, выдерживание в гипотоническом растворе солей (образцы типа I); трипсинизацию, точечное ИК-лазерное воздействие, повторную трипсинизацию (образцы типа II); стабилизирующее действие сшивающих агентов - глицеринового альдегида/рибозы в кислой среде - отмывку (образцы типа III). Для всех типов образцов: 1) установлены параметры стабильности (температура денатурации коллагена с помощью термического анализа и модуль Юнга с помощью механического анализа); 2) определены основные морфологические особенности с помощью световой и поляризационной микроскопии с классическими окрасками препаратов и нелинейной оптической микроскопии в режиме генерации второй гармоники. Результаты. У образцов типа I термические, механические и морфологические свойства практически не отличались от свойств исходной системы носовой перегородки. Значительная часть клеток имела разрушенные мембраны. В образцах типа II термическая стабильность коллагенового каркаса была существенно снижена; модуль Юнга снизился более чем в 4 раза по сравнению с образцами типа I. Коллагеновая структура гиалинового хряща оказалась дезорганизована, тем не менее сохранились морфологические отличия гиалиновой части и надхрящницы. Произошла почти полная децеллюляризация матрикса конструкции. Последовательное воздействие лазерного излучения и трипсина привело к образованию в матрице неполнослойных отверстий с диаметром ~100 мкм. В образцах типа III увеличились как термическая стабильность коллагенового каркаса, так и модуль Юнга (E). Глицериновый альдегид действовал более эффективно, чем рибоза, причем значение Е достигло величины, характерной для интактного гиалинового хряща. Волокна коллагена в образцах типа III были более толстые, чем в образцах типов I и II. Сохранились морфологические отличия гиалиновой части и надхрящницы и несквозные отверстия. Заключение. В результате последовательных обработок солями, трипсином, ИК-лазерным излучением и нетоксичными сшивающими агентами пластина хряща носовой перегородки образует пористую бесклеточную конструкцию, которая состоит из двух слоев, образованных волокнами коллагена типа I (из надхрящницы) и типа II (из гиалиновой части). Для данной конструкции можно задавать стабильность, механические свойства и размеры полостей для заселения клеткам. Это дает возможность использовать конструкцию для замены дефектов суставного хряща.
Ключевые слова
Цель исследования - демонстрация опыта успешного лечения критической острой сердечной недостаточности после кардиохирургического вмешательства путем проведения веноартериальной экстракорпоральной мембранной оксигенации (ЭКМО) с подмешиванием газообразного оксида азота в линию подачи газов в оксигенатор. Материалы и методы. Веноартериальная ЭКМО с подмешиванием в экстракорпоральный контур оксида азота в качестве метода лечения критической острой сердечной недостаточности выполнена 52-летнему пациенту, который был дважды оперирован по поводу острого расслоения грудного отдела аорты, недостаточности аортального клапана. После операции Бенталла-де Боно диагностирована техническая ошибка - нефункционирующий анастомоз к правой коронарной артерии, что послужило причиной развития массивного ишемического повреждения миокарда. Выполнена экстренная реваскуляризация миокарда с конвертированием искусственного кровообращения в ЭКМО, что позволило стабилизировать состояние больного и перевести его в ОРИТ. Результаты. Учитывая резкое снижение сократительной функции сердца и крайне высокий уровень маркеров повреждения миокарда, было принято решение о подаче оксида азота (40 ppm) в экстракорпоральный контур ЭКМО. Положительный эффект был отмечен в течение 8 ч от начала процедуры: почти в 4 раза снизилась концентрация креатинфосфокиназы-МВ и в 2 раза - концентрация тропонина I. Наиболее выраженные изменения наблюдались к моменту окончания 1-х суток: значимое снижение концентрации маркеров повреждения миокарда; снижение показателя VIS в 7,5 раза; улучшение показателей сократительной функции миокарда. Дальнейшая динамика состояния больного характеризовалась стойкой стабилизацией: купированы явления острой сердечной и полиорганной недостаточности, а затем прекращена ЭКМО (общая продолжительность - 82 ч). Пациент деканюлирован на фоне стабильных показателей гемодинамики. Выписан из клиники на 18-е сутки после операции. Заключение. Впервые для проведения поддержки кровообращения после кардиохирургического вмешательства использовалась веноартериальная ЭКМО с подачей в экстракорпоральный контур газообразного оксида азота. Это позволило обеспечить выживание пациента с критическим ишемически-реперфузионным повреждением миокарда после операции.
Ключевые слова
Несовершенство цитологической диагностики рака шейки матки обусловливает поиск альтернативных методов выявления этой патологии. Цель исследования - оценка эффективности использования воспалительных белков в качестве молекулярных маркеров при диагностике онкопатологии шейки матки. Материалы и методы. Проведено проспективное контролируемое исследование, в котором участвовали три группы женщин: 1-я группа (n=13) - с предопухолевой патологией (цервикальной интраэпителиальной неоплазией III степени); 2-я группа (n=49) - больные с раком шейки матки; 3-я, контрольная, группа (n=13) - гинекологически здоровые женщины (средний возраст - 30,0±4,4 года). Исследовали цервикальный эпителий, забранный по стандартной методике с помощью цитощетки с зоны стыка эпителиев шейки матки. Методом проточной цитометрии в цервикальном эпителии определяли уровни воспалительных белков: SAA, ICAM-1, VCAM-1 и sCD27. Результаты. Установлено, что молекулярными критериями наличия предопухолевой патологии и рака шейки матки может служить повышение значений SAA в 3,10 [1,31; 3,28] раза (U=41,0; р=0,02), ICAM-1 - в 2,62 [2,79; 3,50] раза (U=137,0; р=0,001), VCAM-1 - в 5,20 [3,84; 12,37] раза (U=138,5; р=0,001) и sCD27 - в 4,32 [2,07; 5,02] раза (U=109,0; р
Ключевые слова
Протонная терапия (ПТ) ввиду дозиметрических особенностей (образование пика Брэгга, резкий спад дозы) является на сегодняшний день одним из наиболее высокотехнологичных методов лучевого лечения, превосходящим стандартные фотонные методики. Традиционно на протяжении десятилетий ПТ применялась в первую очередь при опухолях области головы и шеи (ОГШ), в том числе локализованных в области основания черепа. И несмотря на то, что в последние годы области применения ПТ заметно расширились, опухоли ОГШ по-прежнему остаются ведущим показанием к облучению протонами, поскольку именно при данных нозологиях физико-дозиметрические и радиобиологические преимущества ПТ позволяют достичь наилучших результатов лечения. Настоящий обзор посвящен применению ПТ опухолей ОГШ в мировой и российской медицине и перспективам ее дальнейшего развития, оценке радиобиологических особенностей ПТ, физико-дозиметрическому сравнению распределения протонов и фотонов. Показаны возможности ПТ при лечении опухолей основания черепа, ОГШ (полости носа, параназальных синусов, носо-, рото- и гортаноглотки и т.д.), опухолей глаза и слюнной железы. Проанализированы исследования по повторному облучению. Приведены последние экспериментальные данные, отражающие благоприятный профиль облучения протонами в сравнении с традиционными видами лучевого лечения. Обзор позволяет сделать вывод о том, что ПТ на сегодняшний день - это динамично развивающийся метод облучения, открывающий новые возможности для повышения качества лечения онкологических больных, в особенности при локализациях новообразований в ОГШ.
Ключевые слова
Изучение влияния вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) на развитие колоректального рака представляется актуальным, особенно в свете активного обсуждения участия данного вируса в канцерогенезе рака желудка. В настоящем обзоре с целью фундаментального понимания процессов, связанных с воздействием ВЭБ на организм человека, уделяется внимание вопросам жизненного цикла вируса, его фазам (латентной и литической), а также белкам, которые могут быть обнаружены в каждую из фаз. Проанализированы работы, сообщающие о роли ВЭБ в развитии колоректального рака. Приводится суммарная таблица с указанием исследуемой популяции, количества образцов, метода и полученного результата. С учетом того, что первичными клетками, поражаемыми ВЭБ, являются лимфоциты, логично предположить участие данного вируса в развитии воспалительных заболеваний кишечника. Приводятся исследования, подтверждающие наличие ДНК вируса в тканях при воспалительных заболеваниях толстой кишки, в том числе при микроскопическом и язвенном колитах. Для подтверждения непосредственного влияния ВЭБ на развитие колоректального рака требуется проведение крупных исследований с применением различных методов детекции вируса и обязательным описанием места его локализации. Кроме того, необходима корреляция этих данных с клинико-морфологическими характеристиками ВЭБ.
Ключевые слова
Тучные клетки играют важную роль в защите организма от аллергенов, патогенов и паразитов, участвуя в развитии воспаления. В то же время имеются данные об их причастности к патогенезу ряда атопических, аутоиммунных, а также сердечно-сосудистых, онкологических, нервных и других заболеваний (аллергии, астмы, экземы, ринита, анафилаксии, мастоцитоза, рассеянного склероза, ревматоидного артрита, воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта и легких, мигрени и т.д.). Диагностика многих заболеваний и изучение функций тучных клеток в норме и патологии требуют их выявления, вследствие чего особую важность приобретает знание о методах адекватной визуализации этих клеток у разных видов животных и человека. В настоящем обзоре представлены данные об основных методах визуализации тучных клеток: ферментно-гистохимическом, иммуногистохимическом, а также гистохимии с использованием гистологических красителей. Основные гистологические красители соединяются с гепарином и другими кислыми мукополисахаридами, содержащимися в тучных клетках, и окрашивают их метахроматически. К их числу относятся толуидиновый синий, метиленовый синий (в том числе в составе краски Май-Грюнвальда-Гимзы), тионин, пинацианол и др. Сафранин и флуоресцентные красители берберин и авидин также соединяются с гепарином. Для маркирования мукозных и незрелых тучных клеток необходимо более продолжительное окрашивание гистологическими красителями или окраска альциановым синим. Более современные методы - ферментно-гистохимический и особенно иммуногистохимический - позволяют высокоизбирательно выявлять тучные клетки с помощью реакции на триптазу или химазу (специфичные для данных клеток протеазы). При иммуногистохимическом исследовании триптаз и химаз следует учитывать видовые различия распределения этих протеаз в тучных клетках человека и животных для адекватного их выявления. Иммуногистохимическая реакция на рецептор к иммуноглобулину Е (FcεRI) и рецептор c-kit не специфична для тучных клеток, но последняя важна для демонстрации их пролиферации при нормальном и злокачественном росте. В обзоре обсуждается также правильная фиксация биологического материала, что имеет большое значение для гистохимического и иммуногистохимического выявления тучных клеток. Отмечено, что в качестве новых технологических подходов для анализа различных популяций тучных клеток применяются флуоресцентные методы иммуногистохимии и многомаркерный анализ в сочетании с конфокальной микроскопией.