Муковисцидоз (МВ) является одним из самых частых наследственных мультисистемных заболеваний. В патогенезе повреждения легких лежит развитие хронического микробно-воспалительного процесса на фоне грубого нарушения мукоцилиарного клиренса. Адекватная и своевременная антибактериальная терапия инфекционного процесса во многом определяет прогноз заболевания. Для выбора эффективного режима дозирования антибактериальных препаратов необходимо учитывать патофизиологические особенности муковисцидоза, которые обуславливают уникальность фармакокинетики (ФК) у этой категории пациентов. В обзоре описано значимое влияние возраста на ФК процессы, такие как: абсорбция, распределение, биотрансформация и элиминация. Раскрыто влияние факторов, влияющих на фармакокинетику антибактериальных препаратов при муковисцидозе в детском возрасте (транзит по пищеварительной трубке, состояние билиарной системы, процессы биотрансформации и т. д.). Изучение фармакокинетики антибактериальных препаратов у детей, больных МВ, позволит повысить эффективность проводимого лечения, снизить риски антибиотикорезистентности и в целом улучшить прогноз.
Сибирское медицинское обозрение
2019. — Выпуск 2
Содержание:
Цель исследования. Оценка динамики показателей национального регистра больных МВ за 2011-2017гг. Материал и методы. Проанализированы данные семи регистров больных муковисцидозом в России с 2011 по 2017гг. Результаты. Отмечено увеличение общего числа пациентов, доли пациентов с диагнозом по неонатальному скринингу, охвата генетическим исследованием, доли выявленных мутаций и их числа. Выявлены изменения в назначаемой терапии: увеличение применения гипертонического раствора натрия хлорида и ингаляционных антибиотиков, уменьшение использования бронхолитиков и внутривенных антибиотиков. В динамике ингаляционные стероиды и урсодезоксихолевая кислота стали меньше назначаться у взрослых, в то время как системные стероиды стали меньше использоваться у детей. Не отмечено существенной динамики в средних показателях возраста, доли взрослых, антропометрических показателях и респираторной функции. Заключение. Оценка динамики показателей регистра является важнейшей в организации и оптимизации медицинской помощи.
Ключевые слова
Цель исследования. Изучение влияния комплекса факторов на состав микробиоты респираторного тракта детей и выявление маркеров клинических состояний пациента. Материал и методы. 94 образца от 60 пациентов в возрасте 3 мес. - 18 лет были исследованы методом массового параллельного секвенирования ампликонов гена 16S rDNA на платформе MiSeq Illumina. Полученные данные анализировали с помощью Microbial Genomics Module программы CLC Genomic Workbench v.9 - 11. Результаты. Показаны значительные отличия микробных сообществ носовых пазух, зева и легких. Для образцов из зева продемонстрирована связь состава микробиоты с возрастом, ОФВ1, клиническим состоянием и классом мутации. В старшей возрастной группе (13-18 лет) в микробиоме зева, повышается доля Proteobacteria и снижается количество «здоровых» таксонов, относящихся к Actinobacteria и Bacteroidetes. В группе с пониженной функцией легких наблюдали более высокий уровень Firmicutes в зеве (83 %), при снижении Proteobacteria и Actinobacteria. Анализ взаимосвязи тяжести состояния пациента и микробиоты зева выявил, что в период обострения происходит повышение доли Proteobacteria (до 46 %) и снижение доли Firmicutes (до 38 %). Обратную тенденцию наблюдали для образцов из легких. Показано, что применение антибиотиков как в отсутствии обострения, так и в стабильном состоянии изменяет состав микробиомного сообщества. На примере одного пациента установлено, что переход в состояние обострения может быть связан с минорными изменениями некультивируемых анаэробных таксонов. Заключение. Таким образом, полученные данные показывают, что исследования микробиома являются одним из наиболее перспективных направлений для выявления надежных биомаркеров состояния респираторного тракта пациентов с МВ, оценки результатов терапии и прогнозирования клинических исходов.
Ключевые слова
Муковисцидоз (МВ) - наиболее частое моногенное заболевание представителей белой расы, обусловленное мутацией гена CFTR, характеризующееся поражением экзокринных желез жизненно важных органов и имеющее обычно тяжелое течение и прогноз. Актуальность изучения роли витамина D у больных МВ связана с особенностями патогенеза заболевания. Цель исследования. Изучение уровня 25(ОНр у детей и подростков с МВ в зимнее время года трех регионов РФ (Московский регион, Красноярский край, Ставропольский край), расположенных на разных географических широтах, для оценки обеспеченностью их витамином D. Материал и методы. В исследование были включены дети с МВ в возрасте от 0 до 18 лет (n=142). Результаты. В ходе исследования было показано, что при изучении уровня 25(ОНр у детей и подростков с МВ в зимнее время года в трех регионах РФ, расположенных на разных географических широтах, определялась высокая частота недостаточности и дефицита витамина D у больных МВ и не достигала оптимального значения 50-70 нг/мл. Заключение. Несмотря на актуальность проблемы дефицита витамина D при МВ, исследований уровня 25(ОНр в различных возрастных группах и профилактических доз витамина D у детей недостаточны. В нашем исследовании было показано, что уровень 25(ОНр в зимний период у большинства детей (как здоровых, так и больных МВ) не достигает оптимального значения 50-70нг/мл. В обеих анализируемых группах с возрастом уровень кальцидиола становится ниже. Частота дефицита витамина D и тяжелого дефицита была значительно выше у пациентов с МВ, по сравнению со здоровыми детьми. Низкие показатели отмечены в Ставропольском крае в отличие от Московского региона и больных Красноярского края. На сегодняшний день, необходимость в разработке новых подходов к профилактике недостаточности и дефицита витамина D является актуальной проблемой.
Ключевые слова
Цель исследования Определение состава и роли вкДНК и нуклеазной активности плазмы крови при поражении дыхательных путей у детей, больных муковисцидозом. Материал и методы. Проводилось исследование концентрации вкДНК и эндонуклеазной активности в плазме детей с муковисцидозом. Концентрация плазменной вкДНК исследована у 115 детей, а уровень нуклеазная активности у 117 больных и 49 здоровых детей соответствующего возраста и пола. ВкДНК выделяли методом фенольной экстракции. Результаты. Показатель вкДНК оказался ниже значений группы здоровых детей (p< 0,05). Также отмечалось снижение нуклеазной активности при обострении бронхолегочного процесса (p
Ключевые слова
Цель исследования. Изучить особенности и разнообразие спектра патогенных генетических вариантов гена CFTR (ABCC7) у российских пациентов с МВ, представленных в Регистре больных муковисцидозом (МВ) Российской Федерации (РФ) 2017г. Материал и методы. Проанализированы результаты генотипирования, включавшего анализ частых патогенных генетических вариантов, секвенирование кодирующей последовательности, поиск генных перестроек гена CFTR, 3096 больных из 81 региона-субъекта Российской Федерации, представленных в Регистре больных МВ в РФ 2017 г. Результаты. Выявлено 196 патогенных генетических вариантов гена CFTR. Суммарная доля 11 генетических вариантов c.1521_1523delCTT (F508del), c.54-5940_273+10250del21kb (CFTRdele2,3), c.274G>A (E92K), c.2012delT (2143delT), c.3718-2477C>T (3849+10kbC->T), c.3846G>A (W1282X), c.2052_2053insA (2184insA), c.1545_1546delTA (1677delTA), c.3909C>G (N1303K), c.1624G>T (G542X), c.413_415dupTAC (L138ins) составляет 75,6 %. 102 редких вариантов обнаружены однократно, 29 - дважды. Как в спектре, так и по частоте у пациентов в РФ преобладают варианты, приводящие к серьезным нарушениям функции белка CFTR (I, II, III классы). 44 генетических варианта не внесены в базы CFTR1 и CFTR2. Заключение. На основании данных Регистра 2017 года определены спектр и относительные частоты патогенных вариантов последовательности гена CFTR у российских больных МВ; описано их распределение в зависимости от класса и типа. Выявлены генетические варианты, ранее не описанные в базах CFTR1 и CFTR2. Полученные результаты могут использоваться для оптимизации генетического консультирования и клинической работы с семьями, отягощенными МВ, а также для дальнейших исследований патогенетической значимости ранее не описанных генетических вариантов гена CFTR.
Ключевые слова
Цель исследования. Применить метод определения разницы кишечных потенциалов (ОРПК) и метод кишечных органоидов (КО) для определения патогенетической роли редких или вновь обнаруженных генетических вариантов гена CFTR. Материал и методы. Проанализированы данные ДНК диагностики пациентов РФ на основе регистра 2017 г, включая секвенирование. Из 3096 больных муковисцидозом РФ генетическое исследование проведено 92,4% больным. Всего выявлено 196 генетических варианта и 94 из них неоднократно. 44 генетических варианта не встречаются в базах CFTR 1 и 2 и требуют описания фенотипа и подтверждения клинической значимости с помощью тестов, характеризующих работу CFTR канала, как метод ОРКП, а так же метод кишечных органоидов. Результаты. Получено несколько культур кишечных органоидов от здоровых людей, от пациента с подозрением на муковисцидоз и больного с генотипом F508del/F508del (c. [1521_1523delCTT];[1521_1523delCTT]). Параллельно использовали метод ОРКП. Оба метода показали однонаправленные результаты. Метод ОРКП показал разнонаправленные результаты теста для пациента с муковисцидозом (генотип F508del/ F508del (c.[1521_1523delCTT];[1521_1523delCTT]) и ребенка с подозрением на муковисцидоз. Результаты теста последнего совпадали с данными, полученными при использовании биоптата кишечника здоровых добровольцев. Морфология полученных культур КО отражает функцию CFTR. Для доказательства работы и надежности форсколинового теста использовали культуру F508del/F508del (c.[1521_1523delCTT];[1521_15 23delCTT]). Было показано, что совместное применение корректора VX-809 и потенциатора VX-770 белка CFTR восстанавливает его синтез и проводимость в эпителиальных клетках кишечных органоидов. Заключение. Таким образом, первый опыт применения методов оценки функциональности анионного канала CFTR у пациентов с установленным и предполагаемым диагнозом муковисцидоза, показал их перспективность, как для диагностических целей, так и для персонифицированного подбора модуляторов CFTR. Результаты, полученные при помощи ОРКП и КО, совпадают.
Ключевые слова
Цель исследования. Обосновать применение комплексного подхода с использованием современных методов идентификации микроорганизмов для микробиологической диагностики ХИЛ у больных муковисцидозом и подтвердить его эффективность. Материал и методы. Исследованы 2300 мазков из зева и образцов мокроты от больных МВ и штаммы S. aureus, P aeruginosa, Bcc и Achromobacter spp., выделенные от больных МВ с 2006 по 2018гг. Использовали бактериологические, биохимические и молекулярно-генетические методы, а также MALDI-TOF. Результаты. Показано, что применение только классических бактериологических методов не обеспечивают достоверную этиологическую диагностику. Установлено, что наиболее трудно с помощью бактериологических методов является идентификация бактерий Achromobacter spp. и Burkholderia cepacia complex. В результате исследования с помощью MALDI-BIOTYPERtm был о идентифицировано 90 видов бактерий, которые были выделены из зева и мокроты больных муковисцидозом. Изоляты Achromobacter spp., выделенные от российских больных МВ, с помощью MALDI-BIOTYPERtm были отнесены к A. ruhlandii, A. xylosoxidans, A. insolitus, A. piechaudii, A. insuavis, A. spanius, среди которых 76 % принадлежали к виду A. ruhlandii и 7,2 % к виду A. xylosoxidans. Для дифференциации бактерий Всс и Achromobacter spp. до вида необходимо использовать мультилокусное секвенирование (MLST) или однолокусное секвенированине генов nrdA765, gltB, blaOXA (для Achromobacter spp.) и gyrB, hisA, fur (для Всс). C помощью MLST среди изолятов Burkholderia cepacia complex (Всс) были идентифицированы 4 вида: B. cenocepacia, B. cepacia, B. contaminans и B. multivorans. Из них 83,3 % принадлежали к виду B. cenocepacia. В результате MLST штаммов P aeruginosa удалось установить, что среди больных МВ циркулирует международный эпидемический клон - ST235, который был причиной госпитальных инфекций в медицинских учреждениях различных стран. MLST позволило выявить генотипы В. cenocepacia ST709 и ST208, A. ruhlandii ST36 и S. aureus ST8 и подтвердить их эпидемическую значимость для больных МВ в России. Заключение. Комплексный подход с использованием MALDI-TOF, амплификации и секвенирования специфических генов, 16SрРНК секвенирования, MLST и секвенирования полного генома (WGS) позволяет идентифицировать возбудителей с максимальной достоверностью, а также установить их эпидемическую значимость.
Ключевые слова
Цель исследования. Буркхолдерии - наиболее опасные микроорганизмы для пациентов с муковисцидозом (МВ). Трансмиссивность буркхолдерий приводит к перекрестному инфицированию и формированию эпидемических штаммов. Совместные усилия врачей, специалистов лабораторной диагностики, ученых способствовали внедрению в практику противоэпидемических мер. Целью данного исследования стал анализ результатов предпринятых мер на выборке часто госпитализируемых пациентов с МВ в период 2014-2018 гг. Материал и методы. Образцы мокроты и аспирата от 670 пациентов, изолированные культуры буркхолдерий стали объектом исследования с применением микробиологических методов, масс-спектрометрии (MicroFlex, Bruker) а также молекулярно-генетических подходов для генотипирования штаммов буркхолдерий. Данные MLST (Multi Locus Sequence Typing) проанализированы с использованием алгоритма goeBURST для установления родства российских генотипов с генотипами, депонированными в базу данных PubMLST. Результаты. Установлено увеличение видового разнообразия буркхолдерий в последние годы. Бактерии видов B. gladioli, B. stabilis были обнаружены в нижних дыхательных путях пациентов с МВ. B. multivorans, разнообразная в группе взрослых, не зарегистрирована в период наблюдений у детей. Увеличилось разнообразие генотипов, выявляемых буркхолдерий. 5 генотипов 709, 710, 728, 208,903 являются общими для деской и взрослой взрастных групп. Отмечена тенденция к снижению количества случаев инфицирования штаммом эпидемического генотипа 709. Опасение в детской группе вызывает высокая частота встречаемости генотипов 208 и 241. Заключение. Данные, полученные на выборке, включающей 87 % пациентов, зарегистрированных как хронически инфицированных буркхолдерией, показали эффективность противоэпидемических мер, а также совместных усилий врачей, специалистов лабораторной диагностики и ученых по своевременной диагностике буркхолдерий с применением современных микробиологических и молекулярно-генетических методов.
Ключевые слова
Цель исследования. Определить выживаемость больных муковисцидозом, дыхательные пути которых хронически инфицированы Eurkholderia cepacia complex (ВСС) по сравнению с больными муковисцидозом с другой хронической грамотрицательной инфекцией. Материал и методы. Проанализированы данные взрослых пациентов муковисцидозом, наблюдающихся в НИИ Пульмонологии за 2003-2018 гг. Проведено ретроспективное продольное сравнительное исследование. Сформировано 2 группы пациентов: - группа «не ВСС» (419 человек), в которую включены пациенты хронически инфицированные любой грамотрицательная флорой отличной от ВСС, как в монокультуре так и в сочетании между собой или с S. aureus - группа «ВСС» (138 человека): пациенты с хронической Burkholderia cepacia complex в монокультуре и/или с S. uureus и/или другой грамотрицательной флорой. Длительность инфицирования грамотрицательной флорой была определена основным исследуемым параметром в анализе выживаемости. Результаты. В группе «ВСС» умерло 48,6 % больных, в группе «не-ВСС» - 25,1 %. Группа «ВСС»: средняя продолжительность инфицирования среди живых составила 9,0 ± 2,9 лет, среди умерших до момента смерти - 6,6 ± 4,0 лет. Группа «не-ВСС»: средняя продолжительность инфицирования среди живых составила 12,4 ± 6,6 лет, среди умерших до момента смерти - 11,6 ± 6,8 лет. Медиана выживаемости с момента инфицирования для группы «ВСС» составила 11,2 (95 % ДИ: 9,55-12,85) лет, для группы «не-ВСС» - 23,8 (95 % ДИ: 21,89-25,71) лет. LogRank Test: х2= 84,1, р Заключение. Инфицирование респираторного тракта патогенами Burkholderia cepacia complex значительно уменьшает продолжительность жизни больных муковисцидозом по сравнению с хронической инфекцией другой грамотрицательной флорой. Таким образом, инфицирование Burkholderia cepacia complex можно отнести как неблагоприятный прогностический фактор для больных муковисцидозом.
Ключевые слова
Цель исследования. Разработка протокола получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) и создание линии ИПСК, полученной из клеток от пациента с муковисцидозом, вызванным гомозиготной мутацией F508del. Материал и методы. ИПСК получали путем репрограммирования культивированных фибробластов кожи пациента с муковисцидозом с помощью вируса Сендай. Наличие мутации в гене CFTR в фибробластах и полученных ИПСК подтверждали методом секвенирования ДНК по Сэнгеру. Полученный клон ИПСК культивировали до стадии эмбриоидных телец и после спонтанной дифференцировки окрашивали иммуноцитохимически. Анализ экспрессии генов в полученной линии ИПСК проводили с помощью иммуноцитохимического окрашивания и полимеразной цепной реакции, сопряженной с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Для подтверждения отсутствия хромосомных перестроек проводили анализ кариотипа полученных ИПСК. Результаты. Полученная линия ИПСК демонстрировала морфологию эмбриональных стволовых клеток. Клетки имели нормальный кариотип 46,XY, специфично окрашивались антителами на маркеры плюрипотентности (Oct4, Nanog, TRA-1-81 и SSEA-4) в иммуноцитохимическом анализе, а также демонстрировали экспрессию маркеров плюрипотентности (OCT4, NANOG и FOXD3) в ОТ-ПЦР. В культуре дифференцированных ИПСК выявлены клетки, положительно окрашенные антителами на маркеры трех зародышевых листков - эктодермы (b-III-тубулин), мезодермы (фибронектин) и энтодермы (а-фетопротеин). Заключение. Таким образом, нами отработан протокол получения и характеризации ИПСК и создана линия ИПСК, а также подтверждена их функциональная и фенотипическая плюрипотентность.
Ключевые слова
Цель исследования. Оценить эффективность и переносимость ингаляций медицинского изделия Гианеб (7% раствор хлорида натрия и 0,1 % раствор гиалуроновой кислоты) и 7 % хлорида натрия у детей старше 12 лет, страдающих муковисцидозом. Материал и методы. 38 больных муковисцидозом в возрасте 12-18 лет, получали муколитическую терапию медицинским изделием (МИ) Гианеб® (Кьези Фармацевтичи, Италия) или 7 % ГР NaCl. Критериями включения в исследование было назначение пациентам с подтвержденным диагнозом «муковисцидоз» и ОФВ1 40-90 %. В конце исследования образовались 3 группы пациентов: 1. Лечение МИ Гианеб в течение 8 недель (n=27); 2. Лечение 7 % ГР NaCl 4 недели, затем МИ Гианеб 4 недели (n=4); 3. Лечение 7% ГР NaCl в течение 8 недель (n=7). Результаты. В ходе 8-недельного исследования МИ Гианеб доказана его эффективность относительно показателей функции внешнего дыхания, получен хороший достоверный прирост ОФВ1. В течение первого месяца наблюдения пациенты из групп Гианеб и ГР NaCl7% демонстрировали одинаковую эффективность, при этом ингаляции Гианеба лучше переносятся. пациентами. Заключение. Ингаляции МИ Гианеб и 7 % раствора хлорида натрия положительно влияют на показатели спирометрии. Ингаляции МИ Гианеб лучше переносятся пациентами, повышают комплаентость к лечению.
Ключевые слова
Муковисцидоз (МВ) - частое моногенное заболевание, наследующееся по аутосомно-рецессивному типу и имеющее тяжелое течение и прогноз. Определяющими для жизни больного являются характер и степень поражения легких, а также системы пищеварения, прежде всего состояние нутритивного статуса. В статье приводится описание клинического наблюдения за ребенком с МВ, с манифестацией заболевания при рождении. У пациентки отмечалось тяжелое проявление нутритивной недостаточности с первых месяцев жизни. Акцентируется внимание на способы коррекции данного состояния с использованием современных продуктов лечебного питания, новых компьютерных технологий и актуальность регулярного диспансерного наблюдения.
Ключевые слова
Цель исследования. Изучить влияние проводимых диспансеризации и профилактических осмотров на показатели заболеваемости населения. Материал и методы. Изучены показатели заболеваемости населения Красноярского края в целом по территории и сравнительная характеристика ее показателей у населения, проживающего в городских поселениях и сельской местности, до изменения в форме 12 (ЗНО) и после внесения изменений (СЗ). Рассчитаны средние показатели заболеваемости по обращаемости (за 2012-2014 гг.) и суммированной заболеваемости (за 20152017 гг.). Для расчета заболеваемости городского населения нами было взято население г. Красноярска, составляющего 48,4 % всего населения городских поселений края, а для сельской местности население 21 района, численность которого составляла 48,7 % всех сельских жителей края. Доля впервые выявленных заболеваний при диспансеризации и профилактических осмотрах, рассчитывалась за период с 2015 по 2017 год, с года издания Приказа МЗ РФ № 87н «Об унифицированной форме медицинской документации и форме статистической отчетности, используемых при диспансеризации определенных групп взрослого населения и профилактических осмотров, порядка по их заполнению». Результаты. Установлено, что средние показатели общей суммарной заболеваемости (за 2015-2017 гг.) населения Красноярского края, по сравнению со средними показателями заболеваемости по обращаемости (за 2012-2014 гг.) снизились на 25,2 %о, у жителей городских поселений на 30,1 % и сельских жителей - 140,5 %. Снижение общей заболеваемости у жителей городских поселений произошло за счет уменьшения показателя ранее известной заболеваемости на 43,6 %, в то время как показатели первичной заболеваемости увеличились на 13,5 %. У жителей сельской местности, снижение произошло как за счет первичной на 104,1 % , так и ранее известной заболеваемости на 36,4 % . В целом по краю, средняя доля впервые выявленных заболеваний в суммарной заболеваемости при проведении профилактических осмотров составляла 2,4 %, а при проведении диспансеризации 1,5 %, от всех первично зарегистрированных заболеваний. В городских поселениях при проведении профилактических осмотров 2,4 % и диспансеризации 1,4 %, в сельской местности соответственно 2,2 % и 3,1 %. Полученные результаты по возрастным группам, имеют аналогичные изменения. Заключение. Полученные данные по динамике заболеваемости населения свидетельствуют: о снижении доступности медицинской помощи; низкой медицинской и профилактической активности населения. Отрицательные темпы прироста средних показателей ранее известных заболеваний показывают, что основная цель диспансеризации взрослого населения, направленная на раннее выявление хронических неинфекционных заболеваний (состояний), являющихся основной причиной инвалидности и преждевременной смертности населения Российской Федерации не достигнута. Заболеваемость, рассчитываемую по форме 12 государственного статистического наблюдения, начиная с 2015 года, следует считать суммированной, так как в нее входят заболевания, выявленные при обращении за медицинской помощью и выявленные при диспансеризации и профосмотрах.