Одним из разделов современной фармакогнозии является морская фармакогнозия, основная задача которого поиск и изучение лекарственного сырья среди биоразнообразия водоемов. Известным представителем водной фауны является артемия салина (Artemia salina L.) вид ракообразных отряда жаброногих (Anostraca G. O. Sars), обитающий в солёных водоемах по всему миру. Благодаря богатому химическому составу (углеводы, аминокислоты, жирные кислоты, каротиноиды, эссенциальные макрои микроэлементы) цисты артемии нашли широкое применение в фармацевтической и пищевой промышленности как источник хитина и хитозана, в аграрной промышленности для получения органоминеральных удобрений, в животнои рыбоводстве как добавка к корму. Учитывая многогранность применения, химический состав и доступную сырьевую базу множество научно-производственных предприятий по всему миру занимаются переработкой цист рачка артемии по различным направлениям. Цель исследования разделение, идентификация и количественное определение аминокислот в субстанции из цист рачка Artemia salina. Объект исследования лиофилизат водного экстракта «Артемия Салина» из цист Artemia salina, производимый научно-производственной компанией «АК Инвест» (Республика Алтай, г. Горно-Алтайск). Исследование проводили методом капиллярного электрофореза со спектрофотометрическим детестированием в ультрафиолетовой области спектра (КЭ-СФМ-УФ) в трех параллелях с последующей статистической обработкой результатов. Методика исследования включает в себя кислотный гидролиз проб раствором хлористоводородной кислоты с концентрацией 6 моль/дм3 при 110оС в течении 14-16 часов с переводом аминокислот в свободные формы, получение фенилтиокарбамильных производных с дальнейшим разделением и определением аминокислот в гидролизате методом капиллярного электрофореза со спектрофотометрическим детектированием при длине волны 254 нм на системе «КАПЕЛЬ® 105М». В лиофилизате водного экстракта определены 12 аминокислот с массовой долей 20.5%, из них 10.88% незаменимых для человека (лизин, фенилаланин, лейцин/изолейцин, валин, треонин) и 9.62% заменимых (аргинин, тирозин, гистидин, пролин, серин, аланин, глицин). В наибольшем количестве из всех обнаруженных аминокислот представлены лейцин/изолейцин (3.52%), аргинин (2.71%), лизин (2.34%), аланин (2.18%) и серин (2.10%).
Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация
2023. — Выпуск 4
Содержание:
Род растений соссюрея (Saussurea DC.) является одним из крупнейших представителей семейства сложноцветные (Asteraceae), его численность превышает 450 видов, широко распространенных на территории всего мира, на территории Сибири произрастает 54 вида. Для наиболее распространенных видов проведено изучение элементного состава, содержания флавоноидов, фенольных соединений и полисахаридов. Группа полисахаридов особенно привлекает внимание исследователей в современной фармацевтической науке, так как для нее характерен широкий спектр биологической активности (гиполипидемические, противовоспалительные, иммуностимулирующие и противоопухолевые свойства). Кроме этого для полисахаридов, выделенных из Saussurea salicifolia, Saussurea controversa и Saussurea frolovii установлено наличие прямого NO-активирующего действия на антигенпрезентирующие клетки. Таким образом, разработка препаратов на основе полисахаридов, выделенных из растений рода Saussurea является актуальной задачей. Однако для введения в фармацевтическую практику необходима разработка методик определения подлинности и количественного содержания, подтверждающих доброкачественность и химический состав, от которого зависит биологическая активность. Валидация методик количественного определения биологически активных веществ является важным этапом стандартизации лекарственного растительного сырья и препаратов на его основе. Целью исследования являлась валидация методик количественного определения полисахаридов соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) DC.). В данной статье предложены и валидированы спектрофотометрические методики количественного определения гексоз и уроновых кислот в полисахаридном комплексе Saussurea salicifolia, основанные на реакциях взаимодействия продуктов гидролиза полисахаридов с фенолом и 3,5-диметилфенолом. Проведена валидационная оценка результатов методик по показателям: специфичность, линейность, правильность и прецизионность. Все валидационные характеристики находятся в пределах критериев приемлемости. Линейность методики установлена в диапазоне концентраций 60-120 % (r>0.99), значения относительного стандартного отклонения варьировались при оценке правильности в пределах 96.92-98.83 %, прецизионности в условиях повторяемости 0.22-2.57 % и воспроизводимости 1.08-2.53 %. На основании вышеописанных результатов доказано, что методики определения гексоз и уроновых кислот валидны по исследуемым показателям и могут рекомендоваться к включению в проект нормативной документации.
Ключевые слова
В статье проанализирован вопрос об оптимизации изотермической адсорбции загрязнителя жидкости с применением модели Дубинина-Радушкевича на базе предложенной концепции мультиадсорбентного изотермического процесса. Хорошо известно, что модель изотермы Дубинина-Радушкевича в основном используется для излучения механизма адсорбции на пористых адсорбентах при нормальном распределении энергии на гетерогенной поверхности. Эта модель удачно отображает процессы адсорбции при использовании растворителя при средних концентрациях загрязнителя. При этом константы qm и β этой модели могут быть определены графоаналитически, а такие показатели как qm и E являются характеристиками адсорбента и следовательно, адсорбент в целях оптимизации некоторого процесса адсорбции может быть выбран по этим показателям. В статье исследуется экстремальные свойства модели Дубинина-Радушкевича применительно к процессу мультиадсорбентной сорбции адсорбата из загрязненной жидкости. В качестве основы построена дискретная математическая модель мультиадсорбентного процесса. В целях исследования экстремальных свойств модели с применением вариационного принципа оптимизации осуществлен условный переход на аппроксимирующую непрерывную модель процесса. При этом используется схема оптимизации изоморфно-голономных систем. Физическим аналогом построенной математической модели является многокюветное устройство очистки жидкости. Определено, что в предлагаемом многокюветном устройстве очистки жидкостей при наличии между указанными показателями взаимосвязи в виде Е = С1·3√qm; C1=const возможен оптимальный режим реализации мультиадсорбционного процесса. Проведенный анализ построенной математической модели сорбции показал, что при выполнении соответствующего условия процесс сорбции может дать максимальный эффект. Техническая реализации предлагаемого многоадсорбентного процесса предполагает использование многокюветного устройства, в i-м из которых применяется адсорбент с показателем qm,i. Адсорбат по кюветам распределяется равномерно. Теоретически показано, что максимальный эффект адсорбции будет получен в том случае, если в выбранных адсорбентах увеличение qm(адсорбционная емкость при насыщении адсорбента (мг/г)); будет сопровождаться ростом величины E (кажущейся энергии адсорбции).
Ключевые слова
Биология семян привлекают все больше внимания со стороны биологов растении. Прорастание семян рассматривается как одна из первых и наиболее фундаментальных стадии жизни растения, так что успех в росте и получении урожая также зависит от этои стадии. Формирование фотосинтезирующих проростков также является решающим этапом в процессе онтогенеза растительного организма, в тот момент, когда прорастающии гетеротрофный «эмбрион» переключается на автотрофныи рост и развитие. Однако у разных видов растении существуют определенные различные механизмы для мобилизации резервов и активизации обмена веществ. Были изучены биохимические, молекулярные и эпигенетические механизмы регуляции активности глутаматдегидрогеназы (ГДГ, КФ 1.4.1.3) в кукурузе (Zea mays L.) при переходе от гетеротрофного типа питания к автотрофному. В результате проведенного исследования было установлено, что в процессе прорастания семян кукурузы глутаматдегидрогеназа играет важную роль, обеспечивая поставку важных интермедиатов. В ходе работы исследована динамика активности глутаматдегидрогеназы в щитках семян и проростках кукурузы в течение первых десяти днеи прорастания. Максимальный уровень активности ГДГ обнаруживается в щитках в первый период прорастающего семени на 1-2 дни, а в проростках (листьях) на 9-10 дни прорастания кукурузы. Установлено, что на второи день прорастания семян кукурузы в щитках исследуемый фермент демонстрирует максимальные значения ферментативнои активности. В течении всех десяти днеи отмечены флуктурирующие изменения в динамике каталитическои активности глутаматдегидрогеназы. Показано, что появление фотосинтезирующеи системы и ее дальнеишее развитие приводит к тому, что роль глутаматдегидрогеназы как поставщика глутамата для синтеза аминокислот постепенно снижается. При этом данныи энзим начинает выступать как поставщик 2-оксоглутарата для ЦТК, что позволяет увеличить приток энергии. Благодаря проведению ПЦР в реальном времени исследовано изменение в транскрипции генов, в геноме кукурузы кодирующих субъединицы гутаматдегидрогеназы. Выявлена роль процесса метилирования СpG-динуклеотидов в составе промотора в регуляции экспрессии генов GDH1 и GDH2 при переходе растительного организма от гетеротрофии к автотрофии.
Ключевые слова
Интенсивное развитие промышленности и сельского хозяйства привело к возрастанию в окружающей среде токсикантов, среди которых особо значимыми являются тяжелые металлы (ТМ). Тяжелые металлы оказывают стрессовое воздействие на растения, приводящее к различным аномалиям в клетках, повреждению структур и метаболических функций, снижению или полному подавлению образования органического вещества. При действии ТМ возникает окислительный стресс, обусловленный возрастанием генерации активированных форм кислорода (АФК). Защита от окислительного стресса в растениях в значительной степени определяется активностью антиоксидантных ферментов, среди которых большую роль играет аскорбат-пероксидаза (АПО), утилизирующая Н2О2. Целью исследования было сравнительное изучение активности АПО в молодых растениях и каллусных культурах in vitro огурца (Cucumis sativus L., сорт Единство) и редиса (Raphanus sativus L., сорт Красный великан) при действии различных концентраций ионов ТМ (Ni2+, Zn2+, Cu2+, Pb2+). Каллусную ткань огурца и редиса высаживали на среду Мурасиге-Скуга с добавлением солей ТМ CuSO4-5H2O, Pb(NO3)2, NiSO47H2O, ZnSO47H2O в конечных концентрациях 10 мкМ, 0.1 мМ и 1 мМ и выращивали 4-5 недель in vitro. Растения огурца и редиса росли 7 суток в стерильных условиях на водных растворах с добавлением ТМ в тех же концентрациях. В семядольных листьях растений и каллусах определяли активность АПО по понижению оптической плотности при длине волны 290 нм (по Nakano, Asada, 1981 с модификациями). Определение активности АПО в молодых растениях и каллусах огурца и редиса, выращенных на фоне различных доз ТМ в среде, показало, что в большинстве вариантов ионы металлов вызывали повышение активности. Это можно рассматривать как защитную реакцию антиоксидантной системы, направленную на утилизацию ТМ-индуцированных АФК в клетках. При сравнении влияния ТМ на активность АПО в растениях и каллусах огурца выявлено, что ионы Pb2+ оказали более сильную активацию АПО в растениях, чем в каллусной культуре, тогда как Zn2+ и Cu2+ наоборот, в клетках каллусной ткани. У редиса более значительная активация фермента была в растениях на фоне Ni2+, Zn2+ и Pb2+, но при действии Cu2+ в каллусах.
Ключевые слова
МикроРНК класс малых некодирующих РНК, имеющих длину от 18 до 25 нуклеотидов и встречающихся в большинстве эукариотических организмов. Важную роль микроРНК могут играть в эпигенетических механизмах регуляции генома, включая метилирование ДНК, модификацию РНК и гистонов. МикроРНК принимают участие в регуляции разнообразных физиологических и биохимических процессов клетки. Имеется ряд светозависимых микроРНК, обеспечивающих реализацию сигнала от различных фоторецепторов растительной клетки. ПЦР в реальном времени позволяет провести количественную оценку зрелой микроРНК при использовании специфических праймеров «стебель-петля» с большой эффективностью и специфичностью. Типичный праймер для обратной транскрипции «стебель-петля» включает 5-8-нуклеотидную последовательность 3'-элемента, комплементарную 3'-концу зрелой микроРНК, последовательность стебля и петли, которая также содержит универсальный 3'-сайт праймирования для последующего ПЦР-РВ. Был разработан специфический зонд для количественной оценки зрелой микроРНК miR165a с помощью ПЦР в реальном времени, который представляет собой 80-нуклеотидную кДНК второй цепи на основе матрицы miR-H1, формируемой при проведении обратной транскрипции. Разработанный зонд охватывает соединение последовательности зрелой микроРНК-стебель-петля, не перекрывает прямой праймер и максимально увеличивает свою длину для увеличения своей температуры плавления. Для количественной оценки зрелой miR165a была выделена суммарная фракция микроРНК из листьев кукурузы. Результаты ПЦР-анализа кДНК, полученной на основе разработанного зонда из листьев кукурузы со специфическими праймерами к miR165a, показали наличие одной полосы при электрофоретическом исследовании, что является результатом специфического связывания праймеров с матрицей. Размер полученных ПЦР-продуктов составил ~80 пн., что совпадает с теоретически рассчитанным размером на основе разработанного зонда для данной микроРНК. Следовательно, использование в качестве матрицы зонда «стебель-петля» к miR165a при получении кДНК, позволяет проводить ее количественную оценку методом ПЦР в реальном времени в кукурузе в различных экспериментальных условиях.
Ключевые слова
Использование метода клонального микроразмножения ценных генотипов древесных культур дает возможность в сжатые сроки производить высококачественный посадочный материал для воспроизводства лесов. Среди преимущества метода можно выделить следующие: сохранение генотипа и хозяйственно ценных признаков, преодоление проблем, связанных с гибелью растений на этапе прорастания, сокращение сроков получения растений, преодоление зависимости от сроков созревания семян и периодов низкого плодоношения. Анализ литературных данных по клональному микроразмножению видов Populus позволяет сделать вывод, что для его различных форм и даже генотипов необходимы специфические условия для стерилизации эксплантов, проведения процесса мультипликации, ризогенеза, а также укоренения и адаптации к почвенным условиям. Разработана технология клонального микроразмножения 5 перспективных генотипов тополя ‘ЭС-38', ‘Регенерата', ‘Ведуга, ‘Осокорь', ‘Сакрау'. Установлено, что использование коммерческого препарата “Domestos” в сочетании с мертиолятом и раствором “Белизна” на этапе введения в культуру in vitro позволяет получать 66.7 100% стерильных эксплантов тополей. Наиболее полно морфогенные свойства растений проявляются на питательных средах WPM и MS, дополненных гормонами 6-БАП 0.3 мг/л, ГК 0.2 мг/л. Оптимизированы условия процесса мультипликации: при соотношениях БАП 0.2-0.5 мг/л коэффициент мультипликации изученных генотипов тополя колеблется от 5-10 побегов/эксплант. Использование более высоких концентраций цитокинина (БАП>0.5 мг/л) приводит к витрификации побегов и сомаклональной изменчивости. Сформировавшиеся на стадии мультипликации пазушные или индуцированные дополнительные побеги, достигшие высоты 1.5 3 см, необходимо укоренить. Процесс ризогенеза у изученных генотипов тополя происходит на среде без добавления дополнительных гормонов за счет высокого уровня эндогенных ауксинов. На 20 сутки ведения процесса ризогенеза длина отдельных корней достигала 7-8 см. Согласно разработанной технологии для всех исследуемых генотипов тополя ‘ЭС-38', ‘Регенерата', ‘Ведуга, ‘Осокорь', ‘Сакрау' были получены растения в культуре in vitro, которые могут быть использованы для получения посадочного материала.
Ключевые слова
В статье рассматриваются вопросы использования микроскопических методов в оценке цитоархитектоники эритроцитов человека. Современная практическая медицина активно оперирует данными автоматических гематологических анализаторов, позволяющих достаточно точно определить не только отдельные показатели крови, такие как количество клеток, уровень гемоглобина, гематокрит, но и отследить динамику эритроцитарных популяций на основании изменений в количестве ретикулоцитов. Показатель анизоцитоза RDW лишь количественно отражает сдвиги в изменениях формы и размеров эритроцитов, и не дает возможности визуализировать мельчайшие изменения мембранной конформации. Использование метода мазка дополняет нюансы исследования гематологических сдвигов и позволяет более детально проанализировать картину крови. Прицельная оценка эритроцитарной морфологии в данном случае может быть затруднена в связи с вариантами подготовки образцов, фиксации клеток и действия поверхностного потенциала подложки, который сам по себе влияет на форму клеток. Наиболее точные данные о малейших изменениях эритроцитарной архитектоники могут быть получены методами микроскопии высокого разрешения, среди которых большой интерес представляет сканирующая электронная микроскопия (СЭМ). Ограничение использования метода СЭМ, в основном, обусловлено отсутствием электронных микроскопов в классических медицинских лабораториях. Поэтому появление высокоточных световых микроскопов, дающих увеличение х600 и более, является перспективным способом актуализации и дополнения данных геманализаторов. Введение световых микроскопов с целью изолированного исследования цитоархитектоники эритроцитов требует разработки специальных подходов пробоподготовки и проведения критической оценки качества проводимых исследований. В настоящей статье нами обсуждаются наиболее распространенные ошибки, возникающие вследствие нарушений пробоподготовки эритроцитов при использовании указанных методов исследования. Приводится иллюстративный материал, акцентирующий внимание на важности строгого соблюдения этапов пробоподготовки; даются рекомендации по минимизации возникновения ошибок. Учитывая, что трансформация эритроцитарных клеток в условиях различного микроокружения является неотъемлемой частью «физиологического ответа» организма на патогенетические явления, своевременная оценка их количественных и качественных изменений повышает шансы на нормализацию его состояния.
Ключевые слова
В настоящее время, на территории Российской Федерации декларирован курс на импортозамещения на всех направлениях, в том числе и на фармацевтическом рынке. Для успешного выполнения обозначенной цели очень важно выявлять новые сырьевые базы, определять наиболее перспективные и необходимые лекарственные препараты, инновационные лекарственные формы и т.д. Для обозначенных направлений, позволяющих выполнить задачу по импортозамещению, и была определена цель и задачи для данного исследования. Цель данного исследования: изучить современное состояние и определить перспективы создания лекарственной формы спрей. Для поставленной цели были определены следующие задачи исследования: 1. определить основные преимущества лекарственной формыспрей; 2. провести анализ ассортимента лекарственных препаратов в форме спрея, зарегистрированных на российском фармацевтическом рынке 3. выявить основные показатели качества, используемые для лекарственной формы «Спреи». Исследования было проведено в три этапа. На первом этапе при помощи контент-анализа был проведен сравнительный анализа двух лекарственных форм спрей и аэрозоль по следующим критериям: размер частиц, тип системы, упаковка, наличие фреона, использование специального технологического оборудования, влияние на озоновый слой. Выявлены основные преимущества лекарственной формы «Спрей». Для второго этапа исследования предварительно была разработана база данных изучаемого ассортимента, при помощи которой в дальнейшем был проведен анализ ассортимента, по таким показателям как: способ применения, по фармакологическому действию, по стране производителя. Материалами послужили следующие источники: государственный реестр лекарственных средств, справочник Видаля. В рамках заключительного этапа исследования был проведен критический анализ нормативных документов, регламентирующих качество лекарственной формы «Спрей» и обозначены основные показатели качества для данной лекарственной формы. В рамках проведенной работы изучено современное состояние использования лекарственной формы спрей, на примере различных фармакологических групп. Полученные результаты исследования можно использовать для обоснования разработки данной перспективной лекарственной формы.
Ключевые слова
Сосны обыкновенной почки (Pini sylvestris gemmae) являются фармакопейным лекарственным растительным сырьем и применяются как отхаркивающее средство в виде настоя. За развитие фармакологического действия почек отвечают эфирные масла. Интерес представляет исследовать состав эфирного масла сосны обыкновенной почек, произрастающих в Пермском крае, а также оценить влияние сушки и антирадикальную активность эфирного масла. Целью работы является исследование компонентного состава и антирадикальной активности эфирного масла свежих и высушенных сосны обыкновенной почек, заготовленных в Пермском крае. В качестве объекта исследования выступали сосны обыкновенной почки, заготовленные на территории Юрлинского, Ильинского и Пермского районов Пермского края. Для получения эфирного масла использовали свежие сосны обыкновенной почки и высушенные воздушно-теневым способом. Эфирное масло получали с помощью прибора Клевенджера по методу 2 Государственной Фармакопеи Российской Федерации XIV издания. Хромато-масс-спектрометрический анализ эфирного масла сосны обыкновенной почек проводили на газовом хроматографе с масс-селективным детектором. Антиради-кальную активность эфирного масла определяли по реакции со стабильным свободным радикалом 2,2-дифенил-1-пикрилгидразилом. По результатам исследования установлено, что во всех изученных образцах эфирного масла сосны обыкновенной почек доминируют монотерпены, на их долю приходиться около 90% от содержания компонентов. Основными компонентами эфирного масла во всех исследованных образцах являлись α-пинен и лимонен. В образцах эфирного масла, полученного из высушенного сырья, обнаружены новые компоненты, которые отсутствовали в составе эфирного масла свежих почек сосны, что говорит о продолжении процессов биосинтеза во время высушивания сырья. В результате исследования антирадикальной активности установлено, что эфирное масло сосны обыкновенной почек из Пермского района обладает наибольшей способностью связывать свободные радикалы. Эфирное масло, полученное из сухого сырья, проявляет более выраженную антирадикальную активность по сравнению с эфирным маслом, полученным из свежего. Изменения в компонентном составе и содержании некоторых компонентов в процессе сушки сырья приводят к повышению антирадикальной активности эфирного масла сосны обыкновенной почек.
Ключевые слова
Протеазы активно используются в пищевой промышленности и медицине. Примерами таких ферментов являются фицин (КФ 3.4.22.3), бромелин (КФ 3.4.22.4) и папаин (КФ 3.4.22.2). Для рационального использования данных энзимов необходимо знать время полного гидролиза субстрата тем или иным ферментом, поэтому целью работы являлось изучение зависимости степени гидролиза азоказеина фицином, бромелином и папаином (растворимыми и иммобилизованными на матрицах среднеи высокомолекулярного хитозанов) от времени инкубации ферментов с субстратом. Объектами исследования были выбраны фицин, бромелин и папаин, носителями для иммобилизации средне(Mr = 200 кДа, степень деацетилирования 82 %) и высокомолекулярный (Мг = 350 кДа, степень деацетилирования 94.85%) хитозаны. Иммобилизацию цистеиновых протеаз проводили методом адсорбции. Инкубацию ферментов с азоказеином осуществляли при оптимальных для их функционирования температурах (37 °С для фицина, 60 °С для папаина и бромелина) в течение 10, 20, 30, 60, 90, 120 и 150 минут. Максимальная степень насыщения фермента субстратом наблюдалась через 30 минут как у фицина, бромелина и папаина в растворе, так и у иммобилизованных образцов. Через 10 минут инкубации степень гидролиза азоказеина нативным и иммобилизованным на среднеи высокомолекулярном хитозанах фицином составила 35.5, 37.8, 36.8 %, а через 20 минут инкубации уже 72.4, 78.0, 78.9 %. Активность бромелина после 10 и 20 минут инкубации с субстратом составила 35.3 и 73.2 % для нативного фермента, для иммобилизованного на матрице среднемолекулярного хитозана 37.1 и 76.2 %, для сорбированного на высокомолекулярном хитозане 34.5 и 72.4 %. Через 10 минут инкубации степень гидролиза азоказеина нативным и иммобилизованным на среднеи высокомолекулярном хитозанах папаином составила 37.9, 37.9 и 40.2 % соответственно, через 20 минут инкубации 78.5, 78.4 и 75.7 %. При увеличении времени инкубирования ферментов с субстратом (до 60 минут и более) показатели активности фицина, бромелина и папаина варьировали в пределах 5 %.
Ключевые слова
Идея создания новых лекарственных препаратов в виде интраназальных лекарственных форм (аэрозолей и спреев) является очень актуальной темой. Разрабатываются и тестируются множество новых комбинаций лекарственных веществ и систем доставок для интраназального введения. Для этого исследователи проводят эксперименты in vivo и на моделях in vitro. In situ системы обладают специфичностью, которая требует разработки новых методов анализа in vitro перед проведением доклинических исследований. Проведение экспериментов in vitro является перспективным направлением, так как данный метод является менее затратным, более удобным в использовании, безопасным и эффективным. Целью данного исследования было разработать in vitro модель для имитации условий носовой полости при интраназальном введении in situ систем. Основываясь на известных данных о строении носовой полости, была разработана модель in vitro, анатомически полностью повторяющая носовую полость. Для оценки качества in situ систем проводилось измерение объема истекания и площади распределения препарата на поверхности разработанной in vitro модели. В качестве испытуемых использовались следующие объекты исследования: назальные спреи (Naphthyzin® 0.1%, ЛЕККО ЗАО (Россия); Afrin®, Contract Pharmaceuticals Ltd (Канада), а также четыре экспериментальных образца с различными составами полимеров (раствор к-каррагинана 0.2% (Marine®70, ООО "ИНГРЕДИКО", Россия), раствор карбомера 0.125% (Carbopol® 971 NF, Lubrizol, USA), раствор натрий карбоксиметилцеллюлозы 0.25% (Natrosol® 250 HHX, ASHLAND, USA), термореверсивный образец состава полоксамер 407 18% (Kolliphor® P 407 micro Geismar, BASF, Germany) + К-каррагинан 0.2% (Marine®70, ООО "ИНГРЕДИКО", Россия)). В качестве сравнения использовали воду очищенную, соответствующую требованиям ФС.2.2.0020.15. С целью проведения валидации методики осуществляли определение линейности, правильности и прецизионности испытаний. На основе полученных результатов была доказана пригодность разработанной in vitro модели для решения различных типов задач в ходе фармацевтической разработки интраназальных систем как классических жидких лекарственных форм для назального введения, так и современных таргетных in situ систем доставки.
Ключевые слова
В данной статье изучаются растения вида астрагал (Astragalus dasyanthus Pall., Astragalus membranaceus L., Astragalus onobrychis L.,), как потенциальные источники для получения противомикробных и противогрибковых лекарственных средств. Всё исследуемое сырье соответствует требованиям нормативной документации и имеет сертификаты. Оценивалось влияние биологически активных веществ, содержащихся в лекарственном растительном сырье на этиологически значимые для человека микроорганизмы: S. aureus, S. epidermidis, E. coli, K. pneumonia, B. subtilis и грибов Candida spp., которые являются возбудителями инфекций верхних дыхательных путей, мочеполовой системы, в том числе внутрибольничных. Приводится анализ количественного содержания суммы флавоноидов (в пересчете на гиперозид) в изучаемых видах астрагала с использованием метода прямой спектрофотометрии. Экстракцию сырья проводили в режиме вакуумного кипения, с оптимально подобранной температурой и временным интервалом, что позволило максимально истощить сырьё, за короткий промежуток времени. Данная методика экстрагирования была ранее разработана сотрудниками кафедры ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет». Оценивали, как отдельные экстракты астрагала, так и микшированный экстракт из трех видов. Была проведена статистическая обработка методики количественного определения. Установлена пропорциональная зависимость между количественным содержанием суммы флавоноидов и степенью антимикробной активности. Суммарное содержание флавоноидов составило 2.90% до 4.80% в зависимости от вида сырья. В ходе исследования выявлена не только антимикробная, но и фунгицидная активность исследуемого лекарственного сырья. Антимикробную активность оценивали диффузным методом, в условиях in vitro на тест-культурах. Исходя из полученных результатов, а также анализа литературных данных антимикробный эффект обусловлен ингибированием флавоноидами синтеза жирных кислот. Наибольшую эффективность показал микшированный экстракт астрагалов, что говорит о сочетанном действии флавоноидов. Таким образом, полученные данные могут быть использованы в дальнейшем, при разработке состава лекарственных препаратов антимикробного и противогрибкового спектра.
Ключевые слова
В медицинской практике для лечения гиперплазии кровеносных сосудов (гемангиом) в последнее время практикуют энтеральное, местное и наружное применение бета-адрено-блокаторов. При этом фармакотерапия с использованием аппликационных лекарственных форм антагонистов адренорецепторов имеет свои преимущества перед пероральным способом введения по ряду причин: удобство применения, высокая биодоступность, локальное воздействие на патологический процесс, отсюда отсутствие системных побочных эффектов (брадикардия, гипотензия, бронхоспазм, бессонница). Разработка новой фармакологически активной композиции и последующее её внедрение в экстемпоральное изготовление или промышленное производство требует всестороннего изучения свойств лекарственного препарата, используя современные чувствительные, точные и объективные методы исследования. Актуальной задачей современного фармацевтического анализа является разработка аналитических методик контроля качества новых лекарственных композиций. Целью настоящей работы являлась разработка способа количественного определения бетаксолола гидрохлорида в мази для лечения гемангиом. Для проведения оценки количественного содержания использовали активную фармацевтическую субстанцию бетаксолола гидрохлорида синтетического происхождения, Тизоль гель (аквакомплекс глицеросольвата титана) и 0.5 % мазь «Бетаксолозоль» (бетаксолола гидрохлорида 0.05 г, Тизоль геля до общей массы 10.0 г). В рамках исследования применяли метод спектрофотометрии в ультрафиолетовой (УФ) области, измерения оптической плотности проводили на приборе СФ-2000 в кюветах с толщиной рабочего слоя 1 см. Статистическую обработку экспериментальных данных производили с использованием пакета прикладных программ Microsoft Office Excel 2016 и метода регрессионного анализа. Методика оценена по валидационным параметрам специфичности, линейности, прецизионности и правильности. В ходе изучения электронных спектральных кривых бетаксолола гидрохлорида определили, что анализ его рационально осуществлять при длине волны 224 нм. В процессе проведения эксперимента установили чувствительность определения селективного бета-блокатора, которая равна 0.727 мкг/мл при A(min) = 0.02. Результаты количественного анализа бетаксолола гидрохлорида в фармакологической композиции «Бетаксолозоль» показали, что масса лекарственного средства (0.0483-0.0556 г) находится в допустимых пределах согласно нормативной документации для мягких лекарственных форм. В рамках настоящего исследования выбраны оптимальные условия реализации спектрофотометрического метода анализа, на основании чего разработан и валидирован способ количественного определения бетаксолола гидрохлорида в мягкой лекарственной форме «Бетаксолозоль» с относительной ошибкой, не превышающей ± 1.80 %.
Ключевые слова
Аллергия серьезная проблема современности. Одним из направлений совершенствования существующих лекарственных средств для лечения аллергии является, прежде всего, создание новых лекарственных форм, а также поиск наиболее рациональных сочетаний из различных фармакологических групп. Не исключение в этом поиске и антигистаминные препараты (например, лоратадин), которые в «тандеме» с ГКС (преднизолон), включенные в инновационные лекарственные формы, могут стать серьезной альтернативой существующему арсеналу лекарственных средств. Лоратадин - один из самых востребованных препаратов второго поколения, антигистаминная активность которого выше, чем у астемизола и терфенадина, вследствие большей прочности связывания с периферическими Н1-рецепторами, препарат лишен седативного эффекта и не потенцирует действие алкоголя. В настоящее время разрабатываются различные виды твердых лекарственных форм пролонгированного действия, в том числе, микрокапсулы, включенные в состав спансул или медул. Микрокапсулирование позволяет предохранить действующие вещества от воздействия внешних факторов, изолировать вещества, способные к взаимодействию, снизить летучесть веществ, маскировать вкус и запах, уменьшить раздражающее действие, обеспечить пролонгированное во времени выделение лекарственных средств. Примером использования микро-капсулирования может служить заключение в оболочки фармацевтической субстанции лоратадина, обладающего антигистаминной активностью. Целью настоящего явилась разработка микрокапсул и микрогранул лоратадина и их всестороннее биофармацевтическое исследование. В этой связи нами были использованы различные методы получения модельных составов микрокапсул и микрогранул лоратадина, определяющих разную скоростью высвобождения активной субстанции и создания на их основе комбинированных лекарственных форм пролонгированного действия. Микрокапсулы получали методом диспергирования в системе несмешивающихся жидкостей, напылением в дражировочном котле. Микрогранулы получали методом влажного гранулирования с использованием водных и спиртовых растворов пролонгирующих полимеров и пленкообразующих покрытий, а твердые дисперсии (ТД) лоратадина методом плавления. В последующем микрокапсулы подвергались оценке по тесту «Растворение». Количественное определение лоратадина в пробах проводилось методом спектрофотометрии. Оптимальными параметрами по времени высвобождения субстанции обладали микрокапсулы, полученные из твердой дисперсии лоратадина с лактозой в цетиловом спирте.
Ключевые слова
Острое отравление суррогатами алкоголя, в т.ч. этиленгликолем (ЭГ) и его эфирами, является актуальной медико-социальной проблемой. Согласно статистическим данным, отравления ЭГ занимают второе место среди интоксикаций техническими жидкостями. Этанол медицинский (95% раствор) разрешен к применению в РФ только в качестве антисептического и дезинфицирующего средства для наружного применения, что существенно затрудняет лечение отравлений такими токсифицирующимися спиртами как ЭГ. Целью данной работы является изучение стабильности 5% раствора этанола в 5% растворе глюкозы для инфузии и определение кинетических параметров этиленгликоля при применении изучаемого раствора. Объектом исследования являются 5% раствора этанола в 5% растворе глюкозы для инфузии, ЭГ (ГОСТ 19710-2019), лабораторные животные белые беспородные мыши массой тела 22-28 г. Животным вводили ЭГ в LD50, в течение 7 сут собирали мочу и определяли его содержание. Исследование выполняли на хроматографе «Shimadzu GC 2010», детектор пламенно-ионизационный, колонки Stabiwax-Rtx, исследование мочи проводили методом прямого ввода пробы. Для методики количественного определения были определены значения требуемых валидационных параметров. Результаты и обсуждение. В эксперименте на животных была установлена летальная доза ЭГ 15 г/кг (1,35 мл / 100 г). Было установлено, что инфузионный раствор этанола необходимо вводить в дозе 7,2 мл/100 г массы тела животного. Проведенные расчеты показали, что количество ЭГ в организме (параметр S ) уменьшилось почти в 1,5 раза, период полувыведения также уменьшился примерно в 1,4 раза по сравнению с контрольной группой. Изменение кинетических параметров ЭГ свидетельствует об ускорении его выведения при применении в качестве антидота разработанного инфузионного раствора 5% раствора этанола в 5% растворе глюкозы и эффективности предлагаемого антидота.
Ключевые слова
Сегодня в фармацевтической промышленности подход «качество путем разработки» (QbD) стал ведущим для обеспечения качества лекарственных препаратов. Эта объединенная концепция и стратегия управления качеством продукции способствует обеспечению безопасности и эффективности для пациентов, которые, как правило, не могут напрямую определять качество лекарственного препарата. Надлежащая производственная практика является компонентом управления качеством фармацевтического производства. Принцип любой надлежащей практики согласно современным руководящим принципам надлежащее документирование всех процессов фармацевтического производства. Процесс валидации и квалификации можно охарактеризовать как процесс доказательства надлежащего соответствия фармацевтического производства заявленным требованиям в нормативной документации. Цель исследования формирование пакета документов по валидации и квалификации традиционного асептического производственного процесса лекарственных препаратов, необходимых для ввода в эксплуатацию нового производственного участка для соблюдения условия надлежащей производственной практики, формирования части регистрационного досье, а также для дальнейшего расчета инвестиционных расходов фармацевтического предприятия. Сформирована иерархия документов подтверждающих надлежащее проведение процесса валидации и квалификации, состоящий из трех основных уровней: системообразующие документы, документы по квалификации и валидации производственного участка, документы по валидации каждого этапа производственного процесса. Анализ необходимых документируемых мероприятий показал, что процесс валидации проводится поэтапно. Первый этап квалификация и валидация помещений, инженерных систем и технологического оборудования. На данном этапе учитываются все мероприятия, которые проводятся после завершения монтажных и пуско-наладочных работ. Второй этап валидация других технологических процессов. Мероприятия данного этапа могут проводится параллельно и независимо от учитываемых в первом этапе. Третий этап моделирование асептического процесса (Media Fill Test), четвертый начало коммерческого производства, производство валидационных серий ЛП. Изучение нормативных документов позволило сформировать иерархическую схему документов, подтверждающих проведение квалификационных и валидационных процедур для запуска производственного процесса. Составлен перечень процедур и документов, подтверждающих соответствие производственного участка фармацевтического предприятия требованиям надлежащей производственной практики. Валидация процесса производства не является разовым процессом.
Ключевые слова
Цель данной работы заключается в исследовании инфраструктурной доступности наркотических и психотропных лекарственных препаратов на региональном уровне (на примере Воронежской области). Методы исследования аналитический и статистический. Доступность наркотических и психотропных лекарственных препаратов исследовалась по показателю территориальной доступности на основании данных реестра лицензий на официальном интернет-сайте Росздравнадзора по состоянию на 01.12.2022 г. и открытых статистических данных по численности населения региона. В ходе исследования проведена оценка доступности наркотических средств и психотропных веществ для жителей города и области, а также анализ медицинских и аптечных организаций на территории города и области, осуществляющих деятельность по обороту наркотических средств и психотропных веществ. Установлено точное количество данных организаций и уровень обеспеченности населения города и области необходимыми наркотическими средствами и психотропными веществами в процентном соотношении. В результате проведенной работы был предложен ряд мероприятий по усовершенствованию условий оборота наркотических средств и психотропных веществ на территории региона: 1) совершенствование налоговой политики в отношении объектов, участвующих в обороте данных препаратов, в части снижения норматива отчисления в региональный бюджет; 2) за счет привлечения бюджетов органов муниципального управления снизить ставки аренды для объектов, участвующих в обороте данных препаратов; 3) разработка мероприятий по привлечению частных инвесторов и их освобождение от налогов на принципах частно-государственного партнерства; 4) совершенствование кадровой политики путем финансового стимулирования фармацевтических и медицинских работников, участвующих в обороте данных препаратов; 5) заключение целевых договоров на обучение студентов в медицинских и фармацевтических вузах с закреплением места работы в объектах, участвующих в обороте наркотических средств и психотропных веществ.
Ключевые слова