Широкая область применения комплексов металлов, избирательно распознающих отдельные нуклеооснования, является достаточным основанием для исследования строения и специфических свойств таких соединений. Уже синтезированы и изучены комплексы родия, отличающиеся высокой селективностью к некоторым видам раковых клеток. Биметаллические комплексы родия хорошо связываются с пуриновыми основаниями и фрагментами ДНК. Изучение комплексообразования родия с аминокислотами и нуклеоснованиями показало достаточно высокую устойчивость комплексов в водной среде, что также делает их привлекательными в исследованиях биоактивности. Представлялось интересным синтезировать ранее не полученные соединения родия, выделить их в индивидуальном состоянии и исследовать их свойства. Путем прямой реакции водного раствора трихлорида родия с аспарагиновой кислотой и пуриновым основанием гипоксантином были синтезированы новые комплексы Rh(III), содержащие биологически активные природные лиганды. Посредством методов элементного анализа, ЯМР и ИК-спектроскопии, а также EXAFS/XANES в твердом состоянии и в водных растворах охарактеризованы некоторые свойства и определено строение полученных комплексов: Rh(Asp)(Asp-)Cl2H2O и Rh(Hyp)2Cl3H2O. Аргентометрическое титрование не показало присутствие хлорид-ионов в комплексах, что позволяет предположить их нахождение во внутренней сфере. Для проверки достоверности предлагаемых трехмерных моделей выполнено сопоставление расчетных (К краевых) и экспериментальных XANES спектров, подтвердившее корректность сделанных выводов. Аспарагиновая кислота является бидентатным лигандом за счет карбоксильной группы и аминогруппы. В ИК спектре полученного комплекса присутствуют полосы неионизированной карбоксильной группы. Анализ смещения полос поглощения в комплексе с гипоксантином показал, что Rh(III) координирует через атомы азота N3, N7 гетероцикла, а также через атом кислорода С=О группы. Также была изучена термическая устойчивость комплексов. Исследование поведения соединений при нагревании показало, что оба комплекса подвергаются термолизу в несколько стадий: дегидратация, происходящая при 50-100 °C; плавление (при 200-350 °C) с одновременным удалением хлороводорода, переходящее в разложение, связанное с выгоранием органической части молекулы. Конечным продуктом термической деструкции является родий. Устойчивых промежуточных фаз не образуется.
Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация
2022. — Выпуск 1
Содержание:
В последние годы заметно возрос прикладной и научный интерес к стевии (Stevia rebaudiana Bertoni). Это связано с наличием в листьях стевии дитерпеновых гликозидов (стевиозидов) - натуральных сахарозаменителей, превосходящих по сладости сахарозу в 50-300 раз, безопасных для человека при длительном употреблении. Стевию интродуцировали во многих странах. Из стевии производят различные подсластители в виде экстрактов, порошка и таблеток. Листья и гликозиды стевии используют в технологиях производства газированных напитков, чаев, йогуртов, выпечки и мороженого. Но биологическая ценность растения заключается не только в наличии гликозидов, немаловажное значение имеет аминокислотный и жирнокислотный состав растительного сырья. В работе был выполнен статистический анализ данных о биохимическом брутто-составе, аминокислотном и жирнокислотном составе листьев стевии, выращенной в разных географических зонах. Были установлены характерные соотношения для протеиногенных аминокислот и высших жирных кислот, обнаруженных в высушенных листьях стевии. Для статистического анализа данных было использовано построение в табличном процессоре Microsoft Excel 2019 матриц парных корреляций. Достаточно тесные линейные корреляции, для которых абсолютное значение коэффициента |R|>0.70 выявлены для 25 пар аминокислот. Значимые прямые (симбатные) корреляции наблюдаются между содержанием глицина, аланина и пролина при изменении состава белков. Содержание фенилаланина прямо пропорционально содержанию аланина, тирозина и аргинина. Содержание валина тесно связано с содержанием треонина и аргинина. Асимбатные корреляции характерны для таких пар аминокислот, как серин с глицином, пролином, валином и лизином. Есть прямые и обратные корреляции между суммарным содержанием протеина и отдельными аминокислотами. Значимые корреляции наблюдаются также между высшими жирными кислотами, выделенными из жировой фазы листьев стевии. Заметная конкуренция наблюдается между пальмитиновой и стеариновой кислотой (асимбатные тренды), аналогичные взаимосвязи наблюдаются между пальмитиновой и олеиновой и линолевой кислотами. В тоже время содержание олеиновой и линолевой кислот варьируют в жирном масле симбатно. Имеется несколько трендов между общим содержанием жирного масла в сырье и отдельными жирными кислотами. Найденные корреляции могут быть полезными в идентификации растительного сырья, а также в биологических, биохимических, фармакологических, диетологических и агрономических исследованиях.
Ключевые слова
Ухудшение водных ресурсов в значительной степени вызвано антропогенными факторами в результате непрерывного производства химических соединений для достижения качества жизни, необходимого современному обществу. В настоящее время в технологиях очистки сточных вод от различных органических загрязнителей, в том числе лекарственных препаратов и фармацевтических субстанций, активно развиваются адсорбционные методы в связи с тем, что использование таких методов позволяет уменьшить остаточные концентрации веществ в растворе вплоть до уровня чувствительности физических методов анализа. В работе исследован процесс адсорбции из водных растворов диклофенака натрия, бензилпенициллина натрия и ципрофлоксацина гидрохлорида с использованием в качестве адсорбентов активированного угля, оксида железа (III) и силикагеля. Адсорбция была изучена при 200С из водных растворов с рН=5.8-6.2, начальной концентрацией диклофенака натрия 0.8-8.0 ммоль/дм3, бензилпенициллина натрия 14.0-70.0 ммоль/дм3 и ципрофлоксацина гидрохлорида 0.4-2.0 ммоль/дм3. Изучено влияние температуры при 8°С и 20С на сорбцию натриевой соли бензилпенициллина на оксиде железа (III) и силикагеле, электролитов на сорбцию ципрофлоксацина гидрохлорида на оксиде железа (III) и силикагеле в изотонических растворах NaCl и CaCl2. Количество адсорбированных лекарственных средств определяли спектрофотометрическим методом. Показано, что сорбционная способность единицы поверхности оксида железа (III) выше, чем у активированного угля, что происходит вследствие большого количества активных адсорбционных центров на поверхности оксида железа (III), однако нивелируется меньшей удельной поверхностью по сравнению с удельной поверхностью активированного угля, 2.8 и 100 м2/г, соответственно. Адсорбция на границе твердое тело - жидкость сопровождается вытеснением ципрофлоксацина гидрохлорида из поверхностного слоя электролитами, при этом, с увеличением заряда катиона электролита сорбционная способность Fe2O3 снижается. Установлена низкая сорбционная способность оксида железа (III) к ципрофлоксацину. Установлена высокая сорбционная способность оксида железа (III) и силикагеля к бензилпенициллину. При понижении температуры адсорбция на поверхности силикагеля повышается, но понижается на поверхности оксид железа (III).
Ключевые слова
Для решения задач селекции в лесном хозяйстве перспективно использование методов определения реакции растений на стрессовые условия на уровне генома. Удобным материалом для исследований в данном случае являются культивируемые in vitro микрорастения. В данной статье представлены результаты оценки влияния солевого стресса на экспрессию генов белка, индуцируемого абсцизовой кислотой и обезвоживанием (abaH), изоцитратдегидрогеназы (cyt-icdh), дельта-1-пирролин-5-карбоксилатсинтетазы (p5cs), генов факторов транскрипции DREB2, DREB1, NAC034 у культивируемых in vitro клонов тополя. Объектами исследования являлись образцы гибрида тополя белого и осины селекции А.П. Царева, тополя белого, триплоидного гибрида тополя белого селекции О.С. Машкиной, и тополя сереющего сорта «Приярский» селекции А.И. Сиволапова, подвергнутые засолению культуральной среды в условиях in vitro. Полученные результаты свидетельствуют о том, что рассматриваемые гены, проанализированные на предмет экспрессии, могут служить маркерами ответа на воздействие солевого стресса. Установлено, что экспрессия гена abaH увеличивается у двух образцов, в то время как у третьего обнаружено снижение данного показателя относительно контроля, четвертый не показал изменений в экспрессии abaH. Для гена cyt-icdh показано увеличение экспрессии у опытных образцов для трех проанализированных генотипов, четвертый образец показал снижение относительного уровня транскриптов данного гена. Установлено, что экспрессия гена DREB1 значительно увеличивается у образцов одного клона, но снижается у остальных. Относительный уровень транскриптов гена DREB2 увеличивается у трех из проанализированных образцов тополя, у одного - снижается. Для гена NAC034 также наблюдается увеличение уровня транскриптов для двух образцов генотипов тополя и уменьшение для двух остальных. Изменение относительного уровня транскриптов, задействованных в данном исследовании генов, у отдельных генотипов может являться следствием развития механизмов адаптации к воздействию солевого стресса. Анализ экспрессии данных генов может быть использован для оценки стрессоустойчивости различных генотипов и сортов тополя в совокупности с другими методами.
Ключевые слова
Целое растение может проявлять органоспецифичность в ответ на влияние стрессовых факторов. Знание роли листьев и корней проростка в формировании ответной реакции на действие стрессора позволит улучшить понимание взаимосвязей между отдельными органами в интактном растении. Особенно интересным представляется в этой связи жирнокислотный профиль, т.к. жирные кислоты выполняют множество важнейших физиолого-биохимических функций в растительном (и не только) мире. Цель исследований: установить роль надземных и подземных органов проростка ячменя в формировании ответной реакции на действие СВЧ-стрессора путем изменения жирнокислотного профиля. В качестве объекта исследований выбрана одна из основных зернофуражных культур - яровой ячмень сорта Симон. Сочетание режимов обработки включали в себя следующие варианты: контроль, без обработки; электромагнитное СВЧ-облучение сухих семян мощностью 0.70 кВт, частотой 2.45 ГГц, с экспозицией 10 сек. Из всех анатомических частей полученных после СВЧ-обработки проростков экстрагировали смесью хлороформа и н-гексана, в которой методом газовой хроматографии определяли содержание жирных кислот. Общее число идентифицированных жирных кислот достигает 20, из них на контрольных вариантах листьев и корней зарегистрировано только по 17 наименований. Все идентифицированные ЖК содержат от 14 до 26 углеродных атомов, т.е. относятся к среднецепочечным, длинноцепочечным и жирным кислотам с очень длинной цепью. В листьях СВЧ-обработанных проростков, по сравнению с нативными образцами, происходит синтез de novo трикоциловой и эйкозеновой кислот, а часть линолевой кислоты подвергается изомеризации. В корнях СВЧ-обработанных проростков синтезируются de novo миристоолеиновая, ацетэруковая и изомер линолевой кислоты. Более 40% всех идентифицированных ЖК в нативных листьях, а также нативных СВЧ-обработанных корнях занимает пальмитиновая кислота. В листьях опытных проростков наблюдается резкое, более чем в 2 раза, уменьшение количества пальмитиновой кислоты, почти столько содержится и гексакозановой кислоты. Отмечается существенная органоспецифичность по отдельным жирным кислотам. Так, количество а-линоленовой кислоты в листьях опытных растений увеличивается на 19.63% относительно контроля, а в корнях, напротив, снижается в 2.84 раза. Найденные различия между ответными реакциями листьев и корней объясняются неодинаковой метаболической активностью и разным вкладом этих анатомических органов проростка в физиолого-биохимические процессы роста и развития. За счет преобразования жирнокислотного профиля проростков происходит компенсация негативного влияния стрессора - электромагнитного поля СВЧ.
Ключевые слова
Изучены физиологические, анатомо-морфологические особенности роста интродуцированных сортов Hippophae rhamnoides в условиях Республики Дагестан: сорта донской селекции - Карамелька, Морячка; сорта азербайджанской селекции - Шафа, Зафарани. В качестве контроля - несортовое местное растение. Опыты были заложены в хозяйстве, расположенном в дельтовой зоне рек Самур и Гюльгеричай Республики Дагестан. Все лабораторные анализы выполнены в лаборатории биотехнологии кафедры ботаники, генетики и селекции Дагестанского государственного аграрного университета имени М. М. Джамбулатова. По показателю однолетнего прироста текущего года в среднем максимальные значения были у сортов азербайджанской селекции: Шафа-25.1 м/куст, Зафарани - 26.7 м/куст. Сорт-опылитель Тозларан имеет показатель 30.1 м/куст, что на 62% больше, чем у несортового растения (11.5 м/куст). В первой половине периода роста листья интенсивнее растут в ширину, затем в длину. Дольше растут листья у сорта-опылителя Тозларан (до 10.08) и у него самые крупные листья. Затем по этому показателю сорта расположены в следующем порядке - Шафа, Зафарани, Карамелька, Морячка. Наименьшие величины листьев отмечаются у несортового растения (6.20/0.37 см). Наиболее устойчивыми к потере влаги среди сортов были листья у сорта-опылителя Тозларан (30.29%). Наименее устойчивы листья у несортового растения (63.98%). Наибольшей устойчивостью к потере влаги среди женских экземпляров характеризуются сорта Шафа (40.22%) и Зафарани (44.19%). У всех исследуемых сортов количество устьиц на нижней стороне листа больше, чем на верхней. Наименьшим количеством устьиц на 1 мм2 на верхнем и нижнем эпидермисе листа характеризуется сорт Шафа по сравнению с другими сортами. Наиболее мезоморфными признаками эпидермиса листа характеризуется несортовой вид, наиболее ксероморфными - сорта Шафа и сорт-опылитель Тозларан. Анализ данных лабораторных исследований показал, что наивысшие показатели засухоустойчивости отмечены у сорта-опылителя Тозларан, наименьшие - у несортового образца (контроль). Среди исследуемых сортов облепихи лучшие показатели у сорта Шафа (35.25%) азербайджанской селекции. Сорта донской селекции имеют показатели ниже на 54.9% по сравнению с сортами азербайджанской селекции. Наиболее мезоморфными признаками эпидермиса листа характеризуется несортовой вид, наиболее ксероморфными - сорта Шафа и сорт-опылитель Тозларан. По химическому составу плоды интродуцированных сортов азербайджанской селекции отличаются от сортов донской селекции. По содержанию сухих веществ сорта азербайджанской селекции превосходят сорта донской селекции. У сорта Шафа отмечено максимальное содержание масла - 4.9%, минимальное у контрольного образца (1.8%). Сорт донской селекции Карамелька содержит сухих веществ на 29 % меньше, чем сорт Шафа. Среди изученных интродуцированных сортов облепихи по совокупности положительных признаков выделили сорта азербайджанской селекции Шафа и сорт-опылитель Тозларан. Они показали высокий уровень устойчивости к абиотическим и биотическим факторам среды, поэтому мы их рекомендуем для производственных посадок в условиях южного Дагестана.
Ключевые слова
Детектируемые изменения белковой молекулы часто связываются с разворачиванием/сворачиванием белковой глобулы, сопровождающимся экспонированием/экранированием ее хромофорных групп относительно поверхности белковой макромолекулы. Основная задача фотобиологии состоит в том, чтобы проследить путь передачи энергии от начального акта поглощения через последовательность физических и химических процессов, ведущих к необратимым изменениям структуры и биологической функции. Были исследованы спектры поглощения растворов нативного и фотомодифицированного (Xmax 254 нм, интенсивность облучения - 1,8 Дж/(см2мин), диапазон исследуемых доз УФ-света - 302 -3020 Дж/м2) бычьего сывороточного альбумина, проанализирована тонкая структура спектров БСА с помощью второй производной, проведена оценка вклада светорассеяния в спектры поглощения исследуемых растворов. Определение гидродинамического радиуса молекулы БСА проводили методом динамического светорассеяния. Скрытые максимумы в спектре поглощения были соотнесены с вкладом определенных аминокислотных радикалов. Поскольку в белковой глобуле все аминокислотные остатки участвуют в образовании связей, поддерживающих пространственную структуру, то выявленные максимумы смещены в длинноволновую область по сравнению с таковыми в свободных аминокислотах, что согласуется с литературными данными. Под действием УФ-облучения молекула альбумина разворачивается, но при этом не происходит образования фотопродуктов ароматических аминокислот, так как не происходит сдвига длин волн электронных переходов в радикалах данных аминокислот. Рассчитаны величины эмпирических коэффициентов, характеризующих вклад светорассеяния в спектры поглощения БСА. Нами показано, что истинные спектры поглощения (то есть с вычетом светорассеяния) фотомодифицированных растворов БСА статистически значимо не отличаются от спектра нативного белка, при этом вклад светорассеяния носит дозозависимый характер (повышается с ростом дозы облучения). Полученные расчетные данные согласуются с определением гидродинамического радиуса молекулы альбумина: воздействие УФ-света в дозах 1510 и 3020 Дж/м2 приводит к увеличению радиуса молекулы БСА.
Ключевые слова
В работе исследована неспецифическая антимикробная активность 17 водных и спиртовых извлечений из растительного сырья Echinacea purpurea (L.) Moench, Echinacea pallida (Nutt.). Nutt., Echinacea angustifolia (DC.) A.Heller, Echinacea tennessesnsis (Beadle) Small, Calendula officinalis L., Coreopsis grandiflora Hogg ex Sweet, Hyssopus officinalis L., Monarda fistulosa L., Monarda didyma L., Monarda х hybrida hort., Myrtus communis cv. Южнобережный, Thymus serpyllym L., Thymus vulgaris cv. Фантазия, Thymus striatus cv. Юбилейный, Satureja montana L., Rosmarinus officinalis cv. Горизонт,Vitex agnus-castus L., заготовленного на территории ФГБУН «Никитский ботанический сад-Национальный научный центр РАН» с использованием природного светящегося штамма Aliivib -rio fischeri F1 и генно-инженерного люминесцентного штамма Escherichia coli MG1655 (Xen'::lux). В результате скрининга были выявлены экстракты с выраженной неспецифической антимикробной активностью, как в водной, так и в спиртовой форме, к которым отнесли Coreopsis grandiflora, Thymus vulgaris cv. Фантазия и Monarda х hybrida. Их эффективные разведения, снижающее уровень люминесценции на 50% (ЭР50), составили 1:100. Умеренная антимикробная активность наблюдалась у экстрактов Thymus serpyllym, Satureja montana, Monarda fistulosa, Myrtus communis cv. Южнобережный, Rosmarinus officinalis cv. Горизонт, Hyssopus officinalis, Monarda didyma и Thymus striatus сорт Юбилейный, Vhex agnus-castus, ЭР50 были равными от 1:25 до 1:100 в водных и спиртовых формах. Эффективные разведения экстрактов Echinacea angustifolia и Calendula officinalis заняли промежуточные значения и составили 1:50. К экстрактам с низким антимикробным потенциалом отнесли Echinacea purpurea, E. pallida, E. tennessesnsis, минимальные значения ЭР50 которых были равными 1:25. Установлено, что ингибирующая активность большинства экстрактов растений усиливалась, при использовании в качестве растворителя 70%-ый этиловый спирт. Полученные результаты сравнивали с действием гентамицина сульфата в исходной концентрации 40 мг/мл, ЭР50 которого составило 1:50. Определено, что природный штамм бактерий A. fischeri F1 обладал большей чувствительностью, как к водным, так и к спиртовым экстрактам растений, в сравнении с рекомбинантным штаммом E. coli MG1655 (Xen'::lux).
Ключевые слова
Фуразолидон - перспективный антибактериальный препарат, обладает специфичным механизмом действия, широким спектром антимикробной активности и низкой резистентностью микроорганизмов к своему действию, что обуславливает обширный перечень показаний к его применению. Проведена сравнительная оценка антимикробной активности субстанции и быстрорастворимых твердых лекарственных форм фуразолидона (гранул и таблеток) методом серийных разведений в жидкой питательной среде (мясо-пептонный бульон). Определены бактериостатические концентрации (мкг/мл), вызывающие остановку роста микроорганизмов под действием субстанции фуразолидона, а также разработанных шипучих гранул и таблеток, содержащих твердую дисперсию фуразолидона, и их плацебо. В качества тест-штаммов использовали: Staphylococcus aureus, Escherichia coli и Proteus vulgaris. На основании полученных экспериментальных данных сделан вывод об эквивалентной или более высокой антимикробной активности шипучих твердых лекарственных форм, содержащих твердую дисперсию фуразолидона, по сравнению с его субстанцией. Установлено, что вспомогательное скользящее вещество натрия бензоат также не влияет на антимикробную активность лекарственной формы, так как содержится в концентрации в 500 раз меньшей, чем нужно для проявления антибактериального действия. Полученные результаты косвенно свидетельствуют об отсутствии образования нерастворимых химических комплексов со вспомогательными веществами быстрорастворимых гранул и таблеток, которые могли бы препятствовать высвобождению субстанции фуразолидона. Полученные данные позволяют рекомендовать разработанные экспериментальные лекарственные формы в качестве новых лекарственных препаратов в виде быстрорастворимых гранул и таблеток фуразолидона для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний полости рта, мочеполовой системы, желудочно-кишечного тракта и различных повреждений кожи. По результатам работы подана заявка в Роспатент № 2021105988 от 10.03.2021 г. «Быстрорастворимая лекарственная форма фуразолидона и способ ее получения».
Ключевые слова
В статье представлены результаты исследований физико-химических свойств пленок лекарственных Секстафаг® на основе желатина. Адгезионные свойства полимеров определяют прочность фиксации пленки на месте аппликации. Установлено, что при плотности 38.25-54.25 мг/ см2 и толщине 0.3-0.4 мм биологическая доступность бактериофагов из матричных систем максимальна. Увеличение или уменьшение плотности приводит к снижению силы отрыва от субстрата и прочности фиксации на месте аппликации. Абсорбционные свойства (набухание) характеризуют диффузионные возможности полимерных систем, определяют скорость и полноту высвобождения бактериофагов из матрицы, прогнозирует пролонгированное действие, а также способность впитывать экссудат. Показано, что с увеличением плотности экспериментальных пленок лекарственных Секстафаг® уменьшается степень абсорбции. Композиции через 15 минут абсорбировали от 122 % до 252 % биологической жидкости, а через 60 минут от 300% до 500%, что свидетельствует о хороших абсорбционных свойствах желатина. Кинетика набухания показывает, что наилучшими абсорбционными свойствами обладают пленки на основе желатина плотностью до 52 мг/см2. Паропроницаемость характеризует фибриллярность структуры пленок, ее порозность и степень аэрации нижележащих тканей. Лекарственные пленки Секстафаг® с плотностью до 52 мг/см2 и толщиной 0.4 мм характеризуются паропроницаемостью, достаточной для аэрации тканей на месте аппликации и обеспечивают наибольшую биологическую доступность бактериофагов из матричных систем. Изучение влияния технологического фактора сушки при температуре 37 °С на стабильность бактериофагов в лекарственных пленках на основе желатина, показало снижение литической активности секстафага у матричных полимерных систем с плотностью более 60 мг/см2. Во всех экспериментальных образцах на основе желатина с плотностью от 25 до 83 мг/см2 компоненты комплексного препарата Секстафаг® сохраняли литическую активность в разведениях не ниже 104. Изучение физико-химических свойств и литической активности лекарственных пленок Секстафаг® на основе желатина показало, что оптимальными физиологическими свойствами обладают матричные системы с плотностью 50-55 мг/см2, характеризующиеся высокой способностью впитывать экссудат, аэрировать ткани, прочно фиксироваться на месте аппликации и сохранять специфическую активность бактериофагов.
Ключевые слова
В статье показано, что цетиризин существует на российском фармацевтическом рынке в виде таблеток, капель для приема внутрь. Актуальность выбранного направления исследований - создание наружных лекарственных форм цетиризина, что позволит расширить фармакологический спектр лекарственного средства отечественного производства. Трансдермальные лекарственные формы имеют различный целевой профиль и в настоящее время уже сформировали значительный их ассортимент. Действующие компоненты трансдермальных лекарственных форм различны не только по своему действию, но и по химической структуре. Это могут быть и синтетические соединения и природные композиции. Поэтому вопросы их нормирования в рамках соответствующих лекарственных форм очень важны. Сконструированы трансдермальный гель и пластырь, которые способны обеспечить контролируемую подачу лекарственного средства через неповрежденную кожу в системное кровообращение в течение длительного времени с заданной скоростью и по заданной кинетической программе. Технология получения трансдермального геля с цетиризином базируется на предварительном формировании основы, осуществляемой сплавлением компонентов: полиэтиленгликоля-400 (ПЭГ-400) и полиэтиленгликоля-1500 (ПЭГ-1500), добавлении пропиленгликоля 1.2, поливинилпирролидона К-30 (ПВП К-30) и поливинилпирролидона К-90 (ПВП К-90), тизоля, диметилсульфоксида (ДМСО), спирта этилового 95 %, цетиризина. Технология получения трансдермального терапевтического пластыря с цетиризином состоит из технологических этапов, которые заключались в последовательном добавлении компонентов: ПЭГ-400, пропиленгликоля 1.2, ПВП К-30, спирта этилового 95 %, цетиризина. Нанесли на алюминиевую подложку и дали подсохнуть. Заламинировали пленкой. Аналитические исследования проводили с учетом необходимости подтверждения подлинности, выполняемых методами ТСХ и УФ-спектрофотометрии. На хроматограмме пятна испытуемых растворов находится на уровне пятна стандартного раствора, что свидетельствует о наличии цетиризина гидрохлорида в разработанных лекарственных формах. Количественный анализ проведен методом УФ-спектрофотометрии. Проведенное аналитическое сопровождение исследований по разработке оригинальных лекарственных форм, трансдермального геля и трансдермального пластыря с цетиризином позволяет предполагать возможность их стандартизации разработанными методиками.
Ключевые слова
Растения народной медицины являются перспективными для включения в арсенал официнальных растительных средств. Грушанка мясокрасная (Pyrola asarifolia Michx.) относится к числу наиболее популярных растений традиционной медицины Восточной Сибири. Надземная часть этого вида заготавливается и используется наравне с сырьем другого вида грушанки круглолистной (Pyrola rotundifolia L.) для лечения и профилактики заболеваний мочеполовой системы. Следует отметить, что химический состав грушанки круглолистной исследован. В ней установлено наличие флавонолгликозидов, простых фенолов, изучена антиоксидантная и противовоспалительная активности. Грушанка мясокрасная менее изучена в этом отношении. В связи с чем, поставлены задачи изучить фенольные соединения листьев Pyrola asarifolia с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и оценить содержание арбутина методом спектро-фотометрии. Изучение качественного состава проведено на приборе «Gilston» (модель 305, Франция) в присутствии растворов стандартных образцов фенольных соединений. Время удерживания определено для изучаемых веществ в отдельности и на модельных смесях. Сырье для исследования - листья грушанки мясокрасной - собрано в Иркутской области в период начала плодоношения. В результате исследований методом ВЭЖХ в извлечении, полученном спиртом 60% концентрации установлено содержание не менее 61 соединения фенольного характера. В сравнении со стандартными образцами идентифицировано 12 веществ - 8 флавоноидов, 3 фенилпропаноида и 1 простой фенол. Впервые в листьях Pyrola asarifolia установлено содержание катехина, лютеолина, лютеолин-7-O-P-D- глюкозид (цинарозид), кверцетина, кверцетин-3-О-Р-Б-галактопиранозида (гиперозида), кверцетин-3-О-рутинозида (рутина), гесперитин-7-рутинозида (геспередина), нарингенин-7-O-глюкозида (прунина); кислот - p-фенилакриловой (коричной), цикоревой, феруловой, а также подтверждено присутствие простого фенола - арбутина. В сумме выделенных компонентов большую часть или 87.86% составляет содержание арбутина, доля флавоноидов - 10.44%, фенилпропаноидов - 1.70%. Методом прямой спектрофотометрии установлено, что в листьях Pyrola asarifolia максимальное количество арбутина выделяется спиртом этиловым 60% при мелкости сырья 1-2 мм и соотношении сырье:экстрагент - 1:50. Выделенная сумма арбутина составляет 5.47±0.09%.
Ключевые слова
Арония Мичурина, более известная как рябина черноплодная, широко культивируется в нашей стране. Она представляет собой гибрид аронии черноплодной и рябины обыкновенной, выведенный И.В. Мичуриным в прошлом веке. Плоды ее хорошо изучены и используются в медицине в свежем и высушенном виде за счет высокого содержания антоцианов. Листья так же содержат большой перечень БАВ: флавоноиды, в том числе антоцианы, танины, аскорбиновую кислоту, сапонины. Достаточно высоко содержание в них дубильных веществ. Дубильные вещества в растительном сырье могут быть определены различными методами: титриметрическими, спектрофотометрическими и т.д. По результатам исследований, которые проводились ранее, был сделан вывод, что оптимальной методикой количественного определения танинов в данном сырье является спектрофотометрическое определение в пересчете на (+)-катехин. Целью исследования являлась апробация и валидация методики количественного определения дубильных веществ в листьях рябины черноплодной. В качестве объекта исследования использовали высушенные листья рябины черноплодной. Собраны они были ранней осенью в период плодоношения растения в Воронежской области в 2019 году, сушка воздушно-теневая. Содержание дубильных веществ в исследуемых листьях составило 10.61%±0.18%. Методика была валидирована по следующим показателям: специфичность, правильность, сходимость, внутрилабораторная прецизионность и линейность. Все валидационные характеристики находятся в пределах критериев приемлемости. При добавлении раствора стандартного образца к извлечению спектр имел значительное увеличение максимума поглощения, что подтвердило специфичность методики. При определении правильности средний процент открываемости для трех добавленных концентраций (+)-катехина составил 101.42%±2.63%, что входит в предел 100%±5%. Использованная методика линейна, так как рассчитанный коэффициент корреляции r>0.99. Стандартное отклонение при определении сходимости составило 1.59%, что не превышает 2%. При исследовании внутрилабораторной прецизионности стандартное отклонение так же входило в норму, не превышая 5% и составляло 4.93%. На основании описанных выше результатов было доказано, что методика определения дубильных веществ валидна по вышеперечисленным показателям и может использоваться для определения дубильных веществ в листьях рябины черноплодной.
Ключевые слова
Плоды облепихи крушиновидной широко изучены и применяются в медицине, чего нельзя сказать о листьях. В РФ разрешён к применению противовирусный препарат - «Гипорамин». Это пока единственный лекарственный препарат, получаемый из экстракта листьев облепихи. Несмотря на активное изучение российскими и зарубежными исследователями биологически активных веществ листьев и их фармакологического действия, их использование крайне ограничено. Это связано с отсутствием нормативной документации по стандартизации данного вида сырья облепихи. Целью исследования являлось определение содержания экстрактивных веществ в листьях облепихи крушиновидной. Объектом служили высушенные листья трёх фенологических фаз: 1 -начало июня (фаза завязывания плодов), 2 - середина июля (фаза единичного созревания плодов), 3 - конец августа-начало сентября (фаза массового созревания плодов), заготовленные в 2021 году. Были использованы экстрагенты с различной полярностью и рН (гексан, хлороформ, этилацетат, ацетон, спирт 96, 70 и 40%, вода очищенная, кислота хлористоводородная разведенная и 0.25% раствор аммиака). Экстракцию проводили по методике 1 Общей фармакопейной статьи «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания. Для оценки влияния ультразвука на выход экстрактивных веществ из листьев использовали ультразвуковую ванну «Град 40-35». Параметры озвучивания: мощность 180 Вт, температура 70 оС, частота 35 кГц. Впервые для изучаемого растительного сырья проведено количественное определение содержания экстрактивных веществ, а также применен метод озвучивания с целью интенсификации выхода экстрактивных веществ из листьев облепихи крушиновидной. Подобраны оптимальные экстрагенты, дающие наибольший выход экстрактивных веществ из сырья. Установлено, что к моменту массового созревания плодов накопление биологически активных веществ в листьях, экстрагируемых спиртом 40 - 70% концентраций максимально. Применение ультразвуковой ванны позволило сократить время экстракции на 1 час (с 120 до 60 минут) при сохранении выхода экстрактивных веществ. Полученные результаты позволят сформировать раздел «Экстрактивные вещества» в проекте фармакопейной статьи.
Ключевые слова
Тирозиназа является металлоферментом класса оксидоредуктаз. Данный фермент принимает участие в каталитическом переносе атома кислорода между двумя соединениями, которые выступают в качестве донора водорода. В результате многоступенчатой реакции аминокислота тирозин превращается в меланин, являющийся пигментом. Ингибиторы тирозиназы применяются в косметических целях и непосредственно для терапии миелолейкоза. Поиск новых средств для лечения гиперпигментации является актуальным направлением современной дерматологи и косметологии. В качестве объектов исследования выступают азометиновые производные 2-амино-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-3-карбоксамида. In silico исследование проводилось методом молекулярного докинга с использованием трехмерной структуры тирозиназы гриба Garicus bisporus из базы данных RCSB Protein Data Bank (rcsb.org) с идентификационным номером 2Y9X. Трехмерные структуры исследуемых соединений были построены в программе HyperChem 8.0.4 и затем геометрически оптимизированы в программе ORCA 4.1. методом теории функционала плотности (UB3LYP) с применением базиса 6-311G**. Молекулярный докинг проводился в программе Autodock 4.0. In vitro активность тирозиназы определяли согласно методу, описанному Mapunya, 2012. Койевая кислота, гидрохинон и молочная кислота в аналогичном диапазоне концентраций использовались в качестве эталонов сравнения. Гидрохинон и койевая кислота были получены от Hunan Warrant pharmaceuticals (КНР), молочная кислота была предоставлена Sigma-Aldrich (Германия). Изучение взаимосвязи структура-активность по дескрипторам выполнялась с помощью веб-ресурса Online chemical database Оптимизация геометрии моделируемых структур проводилась инструментом Open Babel. По результатам вычислительного эксперимента осуществлен прогноз антитиро-зиназной активности и установлены наиболее вероятные конформации моделируемых соединений в сайте связывания фермента. In vitro исследования свидетельствуют, о том, что соединение 7 по антитирозиназной активности сопоставимо по действию с наиболее безопасным депигментрующим агентом - молочной кислотой. Анализ количественной оценки взаимосвязи структура-активность выявил линейную зависимость между показателями Homo Lumo Gap и Absolute Softness, которые были рассчитаны в MOPAC 2016 descriptors (35/3D).
Ключевые слова
Создание липосомальных наночастиц является перспективным способом инкапсулирования лекарственных веществ. Липосомальные формы лекарственных веществ позволяют нивелировать возможный негативный эффект препарата на здоровые ткани, способствуют его более пролонгированному действию. Существуют различные методы стандартизации размеров липосом, одним из основных является ультразвуковая обработка. Ультразвуковая (УЗ) обработка - это простой метод уменьшения размера липосом и производства малых однослойных липосом. Целью настоящего исследования явилась разработка режимов стандартизации размеров липосом с помощью УЗ-обработки и изучение возможности включения в состав полученных липосом макромолекул белков. В данной работе методом гидратации/регидратации были получены липосомальные частицы из фосфатидилхолина. Для создания моноламеллярных структур и стандартизации размера липосом проводили их облучение ультразвуком в течение 1-20 минут (20кГц, 10 секундный импульс с перерывом 3 сек). Размер синтезированных липосом контролировали методом динамического рассеяния света. Было показано, что ультразвуковая обработка в указанном режиме в течение 15 минут способствует образованию липосомальных частиц с наиболее узким распределением по размеру (гидродинамический диаметр липосом составил 173.8 ± 12.5 нм). Важным параметром при получении липосомальных частиц является доля включения в липосомы лекарственного препарата. В случае пассивной загрузки в липосомы гидрофильных соединений их обычно растворяют в водной среде, используемой для гидратации липидной пленки. В зависимости от условий гидратации и свойств препарата меняется от 5 до 20%, а не загрузившийся препарат остается в водной среде, окружающей везикулы. В редких случаях пассивная загрузка гидрофильного препарата достигает 70%. В качестве модельных белков, включаемых в липосомы, использовали инсулин и гемоглобин. Концентрацию белков определяли методом Лоури. Включаемость инсулина составила 57.5 ± 2.2 %, включаемость гемоглобина составила 33.2 ± 2.8 %. При добавлении 8М мочевины включаемость инсулина резко снизилась и составила 13.1 ± 0.5 %. Сделано предположение о значительной роли гидрофобных взаимодействий в процессах включения белков в липосомы.
Ключевые слова