Ноотропы (НТ) - соединения синтетического и природного происхождения, увеличивающие умственные функции мозга. При лечении препаратами, содержащими НТ, возможны негативные последствия при длительном их применении (головные боли, снижение артериального давления) и потенциальная зависимость от них организма. В статье приведен обзор работ, опубликованных в 2005 - 2019 гг., по методам определения и способам пробоподготовки проб, содержащих винпоцетин (ВП), циннаризин (ЦН), пирацетам (ПЦ) и никотиновую кислоту (НК) в лекарственных средствах, биологических средах (моча, плазма, головной мозг) и пищевых добавках. Установлена тенденция роста числа публикаций по методам и способам пробоподготовки объектов анализа и определения НТ в различных средах. Рекомендуется применение жидкостной и твердофазной экстракции для выделения, изолирования, концентрирования НТ из различных матриц. Для определения НТ применяются хроматографические (высокоэффективная жидкостная, газовая, тонкослойная, мицеллярная, ионная хроматографии), электрохимические, спектроскопические (ЯМР, ИК-, Рамановская спектроскопии), спектрофотометрические, флуориметрические методы и капиллярный электрофорез. Приведены условия детектирования НТ, применяемые подвижные и неподвижные фазы (в том числе их состав и режим элюирования), характеристики электрохимического определения, пределы обнаружения в различных матрицах, линейные диапазоны определяемых концентраций. Обсуждаемые в обзоре способы успешно применены: - для определения НТ в коммерческих лекарственных средствах и их бинарных смесях (ВП -фолиевая кислота; ЦН - парацетамол, дименгидринатон, ПЦ - ницерголин, димперидон; ПЦ - пролин); - при анализе биологических материалов, изучения кокинетики, адресной доставки новых разработанных препаратов; - при установлении подлинности лекарств. Приведены способы определения метаболитов НТ и их метаболитов [2-оксопирролидин-1-ил уксусной кислоты, пирролидин-2-она, метил(2-оксопирролидин-1-ил)ацетат и этил(2-оксопирролидин-1-ил)ацетат, аповинкаминовая кислота] в различных объектах, в том числе со сложной матрицей. Для улучшения аналитических характеристик способов и методик определения НТ в различных объектах широко применяются математические методы обработки результатов измерений.
Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация
2021. — Выпуск 1
Содержание:
В статье приведены результаты исследований по межмолекулярным взаимодействиям в фазе высокоосновного анионообменника АВ-17*2П, происходящим при ионном обмене и необменной сорбции аминокислот. В работе показана специфика реакций данных цвиттерлитов, находящихся в форме катионов, биполярных ионов и анионов, в гетерогенных системах «сорбент-сорбат». Отмечено, что поглощение аминокислот, имеющих в R-радикалах группы разной природы, объясняется проявлением не только ионных, но и межмолекулярных взаимодействий. В системах анионит АВ-17*2П (ОН-форма) - вода - аминокислота на начальном этапе сорбции происходит формирование первого нанослоя цвиттерлита на поверхности макропор. Роль поверхностно активного вещества (ПАВ) при этом может быть отведена катионам аминокислот, которые не образуют новые химические связи с функциональными группами анионита. Фиксация катионов на этом этапе осуществляется за счет водородных связей (с участием воды) и дисперсионных взаимодействий гидрофобных радикалов аминокислоты c матрицей сорбента. При поглощении таких аминокислот как лизин и глутаминовая кислота в закреплении ассоциатов «вода-сорбат» на АВ-17*2П особая роль принадлежит именно дисперсионным межмолекулярным взаимодействиям между метильными и метиленовыми группами полимерного каркаса анионита и гидрофобными фрагментами R-радикалов цвиттерлитов. Для ионов тирозина взаимодействие с матрицей анионита идет за счет стекинг-эффекта, обусловленного наличием фенольной группы у сорбата. В результате этих процессов в ИК-спектрах анионообменника в соответствующих аминокислотных формах наблюдается появление новых полос при 1616-1609 см-1; 1519-1515 см-1; 1460-1444 см-1 и сдвиг полос деформационных колебаний: с 1244 до 1270 см-1; c 1153 до 1160 см-1; c 882 до 908 см-1; c 608 до 689 см-1. Показана связь между положением полос валентных и деформационных колебаний в ИК-спектрах анионообменника, насыщенного аминокислотами, и протолитическими превращениями в исследуемых гетерогенных процессах. Рассмотрена роль полярных групп R-радикалов аминокислот в появлении супрамолекулярных образований и мицеллярных микрореакторов в фазе анионита АВ-17*2П. Рассчитаны параметры поверхностного натяжения, влияющие на процесс образования связей между мономолекулярными слоями аминокислот в растворах.
Ключевые слова
Предложена двухфазная водная система изопропанол (ИПС) - вода - сульфат аммония - 4-(2-пиридилазо)резорцин (ПАР) для извлечения и фотометрического определения иридия в экстракте на основе принципов «зеленой» экстракции. Комплекс иридия (IV) с ПАР практически полностью извлекается на 99% ИПС из концентрированных сульфатных растворов. Найдены оптимальные условия расслаивания фаз, извлечения комплекса иридияДУ) с ПАР: концентрация сульфата аммония 2.0-2.7 моль/дм3; соотношение водной и органической фаз 3:1, соотношение иридий: ПАР = 1:20; рН 4.9-5.1. Установлены оптимальные условия образования комплекса иридия (IV) с ПАР. С целью разработки ускоренной методики определения иридия изучены факторы, влияющие на скорость образования комплекса иридия (IV) с ПАР, который проявляет кинетическую инертность при взаимодействии с фотометрическим реагентом. Время образования комплекса иридия с ПАР уменьшается в 3 раза за счет одновременного воздействия следующих факторов: повышение температуры, влияние катионного поверхностно-активного вещества бромида триметилцетиламмония (ЦТА) и активного лиганда ацетат-ионов. Образование комплекса иридия (IV) с ПАР происходит в течение 40 минут при нагревании на водяной бане в присутствии бромида ЦТА и ацетатного буферного раствора. Для получения прозрачного раствора комплекса иридия (IV) в качестве органического растворителя предложен ИПС, который является и экстрагентом. Разработана методика экстракционно-фотометрического определения иридия с ПАР с применением изопропанола. Продолжительность определения составляет 50 мин. Диапазон линейности составляет 0.8-6.0 мкг/см3. В оптимальных условиях определению иридия практически не мешает церий (III), скандий (III), уран (VI), алюминий (III), железо (III), за счёт образования не экстрагируемых сульфатных комплексов. Правильность методики доказана методом «введено-найдено». Относительное стандартное отклонение не превышает 0.07.
Ключевые слова
Изучено влияние обработки деионизованной воды электромагнитным полем ультравысоких частот на интегральную теплоту набухания в ней порошкообразного желатина. Частоту электромагнитного поля варьировали в диапазоне 30- 190 МГц, время воздействия поля составляло от 1 до 5 часов, рН - от 4.0 до 6.3. Для облучения воды использовали высокочастотный генератор и ячейку емкостного типа объемом 100 мл. Показано, что теплота набухания желатина существенно зависит от частоты электромагнитного поля, времени его воздействия, а также рН среды. Установлено, что теплота набухания снижается во всем изученном диапазоне частот (30-190МГц) - максимально на 23% для частоты 70 МГц при постоянном значении рН = 6.3. Исключение составляет частота 190 МГц, для которой наблюдается увеличение Q на 78% (рН = 6.3). Увеличение времени облучения воды от 1 до 3-х часов приводит к нарастанию эффекта. При более длительном облучении (4 - 5 часов) теплота набухания остается на прежнем уровне. Изучена зависимость интегральной теплоты набухания желатина от рН среды при двух частотах электромагнитного поля, соответствующих максимальному снижению (70 МГц) и максимальному увеличению теплового эффекта (190 МГц) и времени облучения, равному 3 часам. Установлено, что во всем изученном диапазоне рН 4...6,3 теплота набухания желатина в облученной воде (70 МГц) ниже, а для частоты 190 МГц -выше, чем в необлученной воде. Исходя из гипотезы об упрочнении надмолекулярной организации воды в результате воздействия поля, можно сделать вывод, что в облученной воде (за исключением частоты 190 МГц) изменение теплоты набухания является следствием усиления межмолекулярного взаимодействия в водной среде. Это приводит к ослаблению сольватации полярных групп полимера при набухании, сопровождающемуся уменьшением количества выделяющейся при этом теплоты.
Ключевые слова
Как известно, при стрессовых воздействиях содержание активных форм кислорода (АФК) в растительных клетках увеличивается, следовательно, повышается интенсивность свободнорадикальных окислительных процессов. В ответ на увеличение АФК, как правило, происходит активация компонентов антиоксидантной системы (АОС) защиты растений. В связи с этим, в статье рассмотрено изменение скорости окисления аскорбиновой кислоты, следовательно, активности одного из высокомолекулярных компонентов антиоксидантной системы защиты растений - аскорбатпероксидазы в двухнедельных проростках твердых и мягких сортов пшеницы под действием наночастиц (НЧ) оксида трехвалентного железа. В ходе проведенных исследований установлено, что активность аскорбатпероксидазы под воздействием НЧ оксида трехвалентного железа в проростках пшеницы зависит от сортовых характеристик. В проростках протестированных сортов твердой пшеницы НЧ оксида трехвалентного железа приводили либо к незначительному или резкому повышению скорости окисления аскорбиновой кислоты (Гырмызы бугда и Гарагылчыг-2) соответственно, либо к понижению активности аскорбатпероксидазы (Ягут), либо практически не вызывали каких-либо изменений (Гарабаг) в интенсивности окисления аскорбата. В случае мягких сортов пшеницы под воздействием НЧ оксида трехвалентного железа наблюдалось резкое повышение активности аскорбатпероксидазы в проростках сорта (Дагдаш), тогда как в проростках сортов (Шеки-1 и Мирбашир-128) наблюдалось понижение скорости окисления аскорбиновой кислоты. В проростках сорта (Гобустан) также наблюдалось повышение активности фермента. Таким образом, полученные результаты могут служить основанием для отбора сортов пшеницы, более устойчивых к абиотическим стрессорам.
Ключевые слова
В ходе разработанной процедуры очистки были получены ферментные препараты аспартатаминотрансферазы (АсАТ, КФ 2.6.1.1) из цитоплазматической и хлоропластной фракций ряски Spirodela polyrhiza (Lemnaceae), клон SJ, которые были использованы в дальнейшем для исследования регуляторных свойств различно локализованных форм фермента. Показано, что на каталитическую активность АсАТ могут оказывать влияние ключевые метаболиты азотного обмена -глутамат, глутамин и аспартат. Выявлено, что в цитоплазматической фракции глутамин ингибирует каталитическое действие АсАТ в ходе прямой реакции, а при обратном трансаминировании является неконкурентным активатором фермента по отношению к L-глутамату. При этом L-аспартат выступает конкурентным ингибитором цитоплазматической формы АсАТ по отношению к L-глутамату. В хлоропластах Spirodela polyrhiza L-глутамат и L-глутамин оказывают сходный ингибирующий эффект на протекание прямой аминотрансферазной реакции, а при обратном трансаминировании L-глутамин может повышать скорость ферментативной реакции. Установлено, что некоторые интермедиаты цикла трикарбоновых кислот могут влиять на состояние трансаминазного равновесия АсАТ-реакции - цитрат, изоцитрат и сукцинат. Так, цитрат является конкурентным ингибитором фермента по отношению к оксалоацетату в ходе обратного трансаминирования, а изоцитрат и сукцинат - конкурентными ингибиторами АсАТ по отношению к 2 оксоглутарату в ходе прямой реакции в цитоплазматической фракции Spirodela polyrhiza. Графическим методом Диксона определены константы ингибирования. Показано, что в хлоропластной фракции сукцинат и изоцитрат оказывают сходное ингибирующее влияние на каталитическое действие фермента как в ходе прямого, так и в ходе обратного трансаминирования. Влияние цисаконитата, трансаконитата и фумарата на активность АсАТ как в цитоплазме, так и в хлоропластах клеток не установлено. Предполагается, что контроль углеродного и азотного метаболизма может осуществляться путем распределения 2-оксоглутарата между различными метаболическими процессами с помощью регуляторных механизмов, воздействующих на активности различно локализованных форм АсАТ в клетках Spirodela polyrhiza.
Ключевые слова
Папаин относится к цистеиновым протеазам с эндолитическим действием. В составе латекса папаий фермент участвует в защите растения от насекомых и фитопатогенов. Папаин находит широкое применение в пищевой промышленности в качестве размягчителя мяса и осветляющего агента. Энзим показывает высокую эффективность при лечении спортивных травм, обладает анальгетической и противовоспалительной активностью в отношении симптомов острого аллергического синусита без побочных эффектов. Известно, что функционирование ферментов определяется их пространственной структурой. Изменение в составе и структуре внутренних полостей, туннелей и пор может влиять на термостабильность биокатализаторов. В работе исследованы состав, локализация и структура внутренних полостей, туннелей, пор в молекуле папаина при ее связывании с различными лигандами: метиловым эфиром А-трет-бутилоксикарбонил-фенил-глицина. сукцинил-Gln-Val-Val-Ala-Ala-p-нитроанилидом, локсистатиновой кислотой (E64-c) и хлорметилкетоном. Все исследованные нами формы фермента показывают сходную локализацию туннелей и пор. Модели 1KHQ и 1PIP характеризуются меньшим суммарным объемом внутренних полостей, чем фермент без лигандов, тогда как структуры 1PPP и 5PAD - их большим объемом. В составе модели 1PIP туннели отсутствуют. Структура туннелей у всех изученных нами форм папаина отличается от таковой для свободного фермента. Показано полное отсутствие пор у свободного и связанного со всеми представленными в работе лигандами папаина.
Ключевые слова
Функционирование сукцинатдегидрогеназы (СДГ) обеспечивает организацию метаболизма клетки как на уровне регуляции цикла трикарбоновых кислот, но и электрон-транспортной цепи митохондрий. Важное значение в данном процессе играет каталитический димер изучаемого энзима, поскольку он осуществляет окисление сукцината, а электроны направляются в ЭТЦ посредством мембраносвязанных субъединиц. Скорость функционирования сукцинатдегидрогеназы может регулироваться на уровне экспрессии генов, в том числе и на уровне изменения статуса метилирования их промоторов. Анализ базы данных нуклеотидных последовательностей GenBank показал, что в геноме Arabidopsis thaliana аннотировано пять генов, кодирующих субъединицы А и В каталитического димера сукцинатдегидрогеназы. Эти гены расположены в разных хромосомах, что позволяет предположить разные механизмы в регуляции их экспрессии. Изучение нуклеотидного состава промоторных областей анализируемых генов сукцинатдегидрогеназы позволило установить их неоднородность по содержанию и распределению по последовательности цитозина и гуанина. Применение методов биоинформатики показано различие в нуклеотидном составе промоторов генов субъединицы А СДГ, в частности только в промоторе гена sdh1-2 показало наличие CpG-островка. Кроме того, для промоторов генов субъединицы В СДГ также показано различие в их организации. Для промоторов генов sdh2-1 и sdh2-2 установлено наличие одного CpG-островка в каждом из них с размерами 156 и 155 нуклеотидов, соответственно. В составе промотора гена sdh2-3 островки не определены. Отсутствие CpG-островков в составе промоторов генов sdh1-1 и sdh2-3 свидетельствует, что их метилирование не всегда проявляется и характеризуется определенной зависимостью со скоростью их экспрессии. Однако, наличие CpG-островка в составе промотора гена, что характерно для промотров генов sdh1-2, sdh2-1 и sdh2-2 указывает на эпигенетический механизм их регуляции путем изменения метильного статуса отдельных CG-динуклеотидов в их составе. Результаты исследования нуклеотидного состава промоторов исследуемых генов каталитического димера СДГ позволили разработать праймеры для проведений метилспецифичной ПЦР для оценки метильного статуса отдельных CG-динуклеотидов промоторов анализируемых генов сукцинатдегидрогеназы при различных экспериментальных условиях.
Ключевые слова
Важную роль в комплексной терапии сердечно-сосудистых заболеваний играет применение ангиопротекторов. Эти лекарственные средства обладают определенной спазмолитической активностью, а так же способны расширять сосуды, влиять на микроциркуляцию в тканях, нормализовать проницаемость сосудов и реологические свойства крови. Помимо этого, они позволяют уменьшить отечность тканей, а так же активируют метаболические процессы, проходящие в стенках кровеносных сосудов. Эта группа препаратов используется при лечении большого количества ангиопатий, в том числе диабетических (включая поражения церебральных и коронарных сосудов, так же сосудов нижних конечностей, различных нефро- и ретинопатиях), ревматических и ревматоидных ангиопатиях, при атеросклеротическом поражении сосудов, при застойных заболеваниях вен и различными воспалительными явлениями (среди которых и варикозные расширения). К спектру применения, помимо вышеперечисленного, относятся трофические язвы и другие патологические процессы. Ангиопротекторное действие способны оказывать некоторые витамины (например, рутин, аскорбиновая кислота), пирикарбат, троксерутин, препараты из плодов каштана конского, глюкокортикоиды, НПВС и некоторые другие вещества. В работе проведено исследование фармацевтического рынка России, в частности г. Воронеж, на предмет наличия препаратов группы ангиопротекторы и корректоры микроциркуляции. Наибольшая доля на рынке по представленным препаратам принадлежит России (43%) и отечественным компаниям (54.6%). Выявлено, что наибольшую часть рынка занимают препараты комбинированного состава (43%), на долю препаратов растительного происхождения приходится 19%, а главными действующими веществами растительного происхождения, наиболее часто входящими в состав данной группы препаратов, являются флавоноиды. Расширение ассортимента растительных препаратов является перспективным направлением исследований, так как такие препараты обладают несомненными преимуществами: препараты на основе растительного сырья обладают более мягким действием, имеют меньший список противопоказаний и побочных действий, а так же более легко выходят на рынок за счет доверия потребителей. Установлено, что на рынке города Воронеж присутствует треть препаратов от всех торговых наименований, представленных на рынке России, при этом количество препаратов отечественного производства соответствует тенденциям рынка России. Для улучшения лекарственного обеспечения населения региона данной группой лекарственных препаратов возможно расширение ассортимента в аптечных организациях города.
Ключевые слова
Данное оригинальное исследование включает описание разработки геля для приема внутрь с pH не менее 5.0, содержащего в качестве структурообразователя природный полисахарид хитозан или одно из его производных (3 разновидности: высоковязкий хитозан "Sigma-Aldrich" в концентрациях 0.5, 1, 1.2, 1.5, 2% и 3%, хитозана сукцинат водорастворимый "Биопрогресс" в концентрациях 1, 6 и 10%, хитозан пищевой низкомолекулярный водорастворимый "Биопрогресс" в концентрациях 1, 2, 3 и 4%), дополнительные активные ингредиенты (6 лекарственных веществ: натрия гидрокарбонат "Вектон" в концентрации 0.6%, оксид магния "Вектон" в концентрации 0.6%, декспантенол "Вектон" в концентрации 0.43%, таурин "Вектон" в концентрациях 4 и 6%, метилурацил "Вектон" в концентрациях 0.5, 1 и 3%, глутаминовая кислота "Вектон" в концентрации 3%) и различные вспомогательные компоненты (в том числе 3 различных органических кислоты для растворения высоковязкого хитозана: ледяная уксусная кислота "Вектон" в концентрациях 0.25 и 0.5%, лимонная кислота "Вектон" в концентрации 2%, аскорбиновая кислота "Вектон" в концентрации 4%). Выбрана оптимальная технология изготовления и оптимальный состав геля для приема внутрь, содержащего 1% хитозана высоковязкого Sigma-Aldrich и 0.25 мл ледяной уксусной кислоты, что позволяет получить прозрачный гомогенный гель, стабильный при хранении при комнатной температуре не менее 18 месяцев с pH 5.30±0.015. В результате проведенных исследований по технологии разработки геля, содержащего хитозан установлено, что дополнительные активные ингредиенты, такие как таурин в концентрациях 4 и 6% и декспантенол в концентрации 0.43% являются совместимыми с разработанным составом геля. Разработанные хитозановые гели с таурином и декспантенолом являются прозрачными, гомогенными, стабильными при хранении при комнатной температуре не менее 18 месяцев, pH 5.28±0.006 для геля с таурином и 5.26±0.004 для геля с декспантенолом.
Ключевые слова
Для цели усовершенствования оценки фармакокинетических параметров папаверина наиболее перспективным является метод вольтамперометрии. Целью работы является разработка вольтамперометрической методики количественного определения папаверина в модельных растворах и апробация ее на образце лекарственного препарата. В качестве объекта исследования для подбора оптимальных условий электролиза использовали субстанцию папаверина гидрохлорида (6,7-Диметокси-1-(3,4-диметоксибензил)-изохинолина гидрохлорид), М.м. 375.86, с содержанием действующего вещества 99.9%, Sigmaaldrich.com, каталожный номер P3510, годен до 12.05.2021г., стандартизованную в соответствии с Европейской Фармакопеей. Экспериментальные данные получены на полуавтоматическом анализаторе ТА-4 (ООО НПП «Техноаналит», г. Томск). В работе использовали стеклоуглеродный электрод в качестве индикаторного, и хлорсеребряный (Ag/AgCl) - электродом сравнения. Источником информации служили вольтамперные кривые. Спектры поглощения и значения оптической плотности получены на однолучевом автоматизированном спектрофотометре СФ-56 (Россия). Каждое из приведённых цифровых значений является средним из трёх измерений. Экспериментальным путём установили оптимальное значение потенциала электролиза, которое составило 0.4 В, оптимальное время электролиза - 25 с. Область развёртки потенциала соответствовала значениям: от (-2.0) до (0.2) В. Наряду с имеющимися параметрами экспериментальным путем определили рациональную скорость развёртки потенциала, равную 25 мВ/с. Предел обнаружения папаверина составил 0.385 мг/л. Минимальная определяемая концентрация папаверина составила 1.182 мг/л. Правильность всех подобранных условий оценена способом «введено - найдено». Погрешность методики составляет не более 4.3%, что соответствует погрешности вольтамперометрического метода, причём коэффициент Стьюдента, полученный расчётным путём, не превышает табличный. Специфичность методики оценивали на основе результатов десяти параллельных определений суппозиториев с папаверина гидрохлоридом 20 мг № 10 («Дальхимфарм», серия 40819, срок годности до 09.21), спектрофотометрическим и вольтамперометрическим методами. Относительная ошибка среднего результата определения папаверина в лекарственном препарате «Суппозитории с папаверина гидрохлоридом 20 мг №10» не превышает 4%. Таким образом, разработана методика вольтамперометрического количественного определения папаверина в модельных растворах и лекарственных препаратах.
Ключевые слова
Статья посвящена разработке оптимальных лекарственных форм с мексидолом (этилметилгидроксипиридина сукцинат) и их биологическим исследованиям. Известно, что мексидол является ингибитором свободнорадикальных процессов, мембранопротектором, обладающим антигипоксическим, стресс-протективным, ноотропным, противосудорожным и анксиолитическим действием. Препарат повышает резистентность организма к воздействию различных повреждающих факторов (шок, гипоксия и ишемия, нарушения мозгового кровообращения, интоксикация алкоголем и антипсихотическими средствами (нейролептиками). Механизм действия мексидола обусловлен его антиоксидантным, антигипоксантным и мембранопротекторным действием. Традиционное введение лекарственных форм (ЛФ) характеризуется быстрым и неконтролируемым высвобождением лекарственных веществ (ЛВ) в организме. Применение же ЛФ с контролируемым высвобождением позволяет повысить эффективность проводимой терапии, удерживать постоянный уровень ЛВ в терапевтической концентрации в плазме крови, избежать передозировки и, тем самым, открывает возможность использования принципиально новых групп действующих веществ. В настоящее время всё большее внимание исследователей привлекают наружные аппликационные ЛФ резорбтивного действия, имеющих многочисленные достоинства. Трансдермальное введение лекарственных препаратов (ЛП) оказалось рациональным и перспективным методом при лечении системных заболеваний, позволяющим осуществлять непрерывное, контролируемое поступление активного вещества во внутреннюю среду организма. Использование трансдермальных терапевтических систем (ТТС), способом применения которых является аппликация на участок кожи, обеспечивает пролонгированное поступление лекарственных средств через кожу в организм, соответствующую поддержку их терапевтической концентрации в плазме крови, даёт возможность заменить инъекции, устранив их потенциальную опасность и неудобство, снизить токсичность многих ЛП, упростить способ введения, прекратить всасывание при удалении терапевтической системы с поверхности кожи, а также обеспечить контролируемое высвобождение ЛВ. Интересным, в этом плане, может быть трансдермальный терапевтический гель (ТТГ). Большинство заболеваний, а также физические и умственные нагрузки сопровождаются состоянием гипоксии, в том числе и у детей. Наиболее удобной лекарственной формой для внутреннего применения в этом случае, являются сиропы, в виду удобства приема, возможности коррегирования вкуса, цвета и запаха. Использование в практической медицине сиропа с мексидолом, позволит существенно расширить возможности применения данного препарата и расширит целевую аудиторию.
Ключевые слова
Бактериальные коллагеназы являются металлопротеиназами, участвующими в разложении внеклеточного матрикса клеток животных из-за их способности гидролизовать нативный коллаген. Патогенные микроорганизмы (в основном Clostridium histolyticum), известные как продуценты микробной коллагеназы, могут расщеплять каждую полипептидную цепь коллагена на несколько участков. Известно, что они действуют как экзотоксин и нарушают метаболизм соединительной ткани за счет гидролиза коллагена в клетках. Коллаген является основным белком внеклеточного матрикса тканей, таких как сухожилия, кожа, хрящи и кровеносные сосуды, а также органическим компонентом зубов, костей и роговицы. Коллагеназы часто используются для выделения клеток из тканей в медицинских исследованиях. Эти ферменты успешно применяют для удаления и перемещения клеток поджелудочной железы. Сегодня коллагеназу рассматривают в качестве лекарственного средства и, по-видимому, она может заменить некоторые инвазивные методы лечения заболеваний, при которых чрезмерное отложение коллагена вызывает нарушения физиологических функций организма. Коллагеназа гидролизует нативный коллаген, денатурированный коллаген и желатин. Фермент осуществляет протеолиз по пептидным связям остатков пролина и оксипролина. В настоящей работе была изучена субстратная специфичность коллагеназы по отношению к следующим субстратам: бычий сывороточный альбумин (БСА), липаза из поджелудочной железы, а-казеин молока, a-амилаза из поджелудочной железы, фосфатаза, гемоглобин, яичный альбумин, цитохром с, сывороточный альбумин человека (САЧ), каталаза, коллаген. Активность фермента определяли методом Лоури (по разности между содержанием белка в растворе субстрата без и с 30 минутной инкубацией с ферментом при 37 °С). Установлено, что только коллаген с высокой скоростью гидролизуется коллагеназой. По отношению к остальным белкам (бычьему сывороточному альбумину, липазе, гемоглобину, каталазе, казеину молока, амилазе, яичному альбумину, цитохрому с, фосфатазе и сывороточному альбумину человека) была выявлена низкая каталитическая способность нативной и иммобилизованной на матрице хитозана коллагеназы. Снижение протеазной активности иммобилизованной коллагеназы по сравнению со свободной, вероятно, связано со стерическими ограничениями доступа высокомолекулярных субстратов (белков) к активному центру фермента, обусловленными матрицей хитозана.
Ключевые слова
В медицинской практике для лечения опухолевых процессов, в частности для лимфом, широко практикуют периодическое применение цитостатиков и глюкокортикоидов [1,2]. Циклофосфан, имеющий противоопухолевый эффект, и преднизолон, обладающий противовоспалительным действием, включены в схемы лечения онкобольных. В статье представлены оценка и расчёт фармакокинетических параметров преднизолона и циклофосфана у животных и пациентов с лимфомой на основе исследования биологических объектов методом спектрофотометрии. Установлены фармакокинетические параметры преднизолона и циклофосфана [3]. Цель работы - проведение фармакокинетических исследований с участием животных и пациентов на основе ранее разработанных эспресс-методик количественного определения преднизолона и циклофосфана в биологических объектах. Для работы использовали инъекционный раствор преднизолона 25 мг/мл (производитель «Никомед», Дания) для внутривенного и внутримышечного введения, лиофилизированный порошок циклофосфана (производитель ОАО «Биохимик», г. Саранск) и 0.9% раствор натрия хлорида. Оптическую плотность растворов измеряли на спектрофотометре СФ-56 (Россия) и Shimadzy UV-1202 (Япония) в кюветах 1 см относительно растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального иономера «Анион 4100». Использованы методики с оптимальными условиями пробоподготовки сыворотки крови для определения циклофосфана и преднизолона с объемом анализируемых образцов от 0.5 до 1.0 мл, что позволило проводить фармакокинетические исследования пациентов в щадящем режиме. Рассчитаны фармакокинетические параметры у животных и больных с лимфомой (начальная и поддерживающая дозы, период полувыведения, константа скорости элиминации, константа скорости всасывания, токсическая и эффективная концентрации) преднизолона и циклофосфана на основе разработанного спектрофотометрического экспресс-метода при анализе сыворотки крови. Провели определение фармакокинетических параметров у животных и пациентов с лимфомой разработанными нами ранее методиками количественного определения преднизолона и циклофосфана методом спектрофотометрии в ультрафиолетовой области. Методики и данные фармакокинетических исследований могут быть использованы для мониторинга концентраций с подбором индивидуальных доз лекарственного средства и обнаружения препаратов в биологических образцах.
Ключевые слова
Лекарственный препарат «Кардикет®» (SCHWARZ PHARMA, Германия) - периферический вазодилататор с преимущественным влиянием на венозные сосуды. Действующим веществом «Кардикета» является изосорбида динитрат. Данный препарат вызывает расслабление гладкомышечной стенки сосудов и может применяться сублингвально для купирования приступов стенокардии, однако, в основном назначается перорально для достижения более длительного эффекта. При сублингвальном и пероральном приемах изосорбида динитрат поступает в кровоток и, соответственно, может влиять на структурные особенности мембран эритроцитов. В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследования стало изучение с помощью методов сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) и спектрофотометрии в УФ- и видимой областях спектра структурных изменений эритроцитов, модифицированных воздействием лекарственного препарата «Кардикет» в течение разного временного периода (1 и 24 ч). Контрольные образцы суспензий эритроцитов содержали 93.6 % дискоцитов; 4.4 % обратимо деформированных и 2.0 % необратимо деформированных клеток. Показатели индексов трансформации имели следующие значения: ИТ равен 0.07 ± 0.04; ИОТ - 0.05 ± 0.003; ИНОТ - 0.02 ± 0.001. Параметры цитоархитектоники и электронных спектров поглощения нативных эритроцитов соответствовали морфологической картине красных клеток крови здорового человека. Данные показатели архитектоники и ЭСП интактных клеток не изменялись после термостатирования в течение 1 ч. Однако после 24 ч инкубации количество дискоцитов в суспензии снизилось до 70.4 %, а количество ОД и НД форм увеличилось до 19.4 и 10.2 % соответственно, при этом смещений пиков на электронных спектрах поглощения образцов не наблюдалось. Воздействие на эритроциты лекарственного препарата «Кардикет» в течение 1 ч приводило к изменениям ряда параметров. Так, число нормоцитов понизилось до 86.2 %, а содержание ОД и НД форм возросло до 11.0 и 2.8 %. В присутствии органического нитрата не наблюдалось смещения максимумов поглощения препаратов в УФ- и видимой областях спектра. По прошествии суточной инкубации клеток с нитровазодилататором содержание дискоцитов уменьшилось до 38.2 %, а доля ОД и НД клеток повысилась до 44.2 и 17.6 % относительно контроля; изменения ЭСП эритроцитов указывают на окисление гемсодержащего белка красных клеток. Высокая реакционная способность оксида азота способствует образованию токсичных свободных радикалов, в частности, пероксинитрита. Пероксинитрит оказывает повреждающее действие на белки эритроцитарной мембраны и вызывает переход гемоглобина в метформу. Другими важными реакциями пероксинитрита являются его реакции с сульфгидрильными группами аминокислот. Так, реакция пероксинитрита с цистеином приводит к окислению SH-группы, а в результате нитрования тирозина, в его ароматический цикл в соседнее положение с гидроксильной группой включается нитрогруппа. Такая реакция влияет на структурные и функциональные свойства внутриклеточных и мембраносвязанных белков, а окисление внутриэритроцитарного гемоглобина ведет к потере гибкости цитоскелета, деформируемости эритроцитов, повышенной хрупкости их мембран и гемолизу. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что, вероятно, препарат «Кардикет» может оказать цитотоксическое действие на эритроциты при длительном и регулярном употреблении, отчетливо это может проявиться у пациентов, которые имеют выраженные сердечно-сосудистые патологии. Следует установить наблюдение и контроль за структурным состоянием эритроцитарных клеток у пациентов, чтобы исключить негативное воздействие органических нитратов с целью получения максимально благоприятного эффекта.
Ключевые слова
В последние годы во всем мире прослеживается увеличение интереса населения к лекарственным средствам из растительного сырья. Использование средств растительного происхождения, в первую очередь, обусловлено их комплексным воздействием на организм больного и безопасностью при лечении различных хронических заболеваний или в целях профилактики. Преимуществами данных средств являются низкая токсичность, высокая эффективность и минимальные побочные действия при их применении. Растущий спрос на природные растительные компоненты вынуждает искать и исследовать всё новые источники получения полезных биологически активных соединений. Одним из таких биологически активных соединений является филицин, который встречается в растениях рода Dryopteris. В статье представлены результаты изучения химического состава D. fragrans и разработки способа получения филицина из корневищ D. fragrans. Щитовник пахучий широко применяется в традиционной медицине якутов при лечении различных заболеваний. Произрастает по всей территории Якутии и является одним из самых распространённых видов папоротниковых. Сбор растительного материала проводился в 2018 г. в Оймяконском районе Республики Саха (Якутия). Для анализа растительного сырья проводился сбор надземной и подземной части растения в период его цветения. Сбор и хранение сырья осуществлялись согласно требованиям ГФ XIII. Количественное содержание дубильных веществ, алкалоидов определяли методом титриметрии, аскорбиновую кислоту и полисахариды определяли методом спектрофотометрии. В результате метаболомного исследования, было выявлено, что в D. fragrans накапливает следующие биологически активные соединения: дубильные вещества - 1.73±0.20%, алкалоидов - 0.70±0.03%, аскорбиновой кислоты - 0.65±0.05%, полисахаридов - 0.85±0.01%. Для разработки схемы получения филицина из D. fragrans были установлены оптимальные параметры: экстрагент - этиловый эфир, температура экстракции 20 °С, степень измельчения сырья 2 мм, соотношение сырье: экстрагент 1:6. Впервые изучен качественный и количественный состав биологически активных соединений D. fragrans, и разработан способ получения филицина из D. fragrans, произрастающего в Якутии.
Ключевые слова