В течение 120-летней истории жидкостной хроматографии (ЖХ) были падения и триумфы. Первые 30 лет - это время непонимания и практически забвения. Хотя отдельные специалисты признавали важность метода, например, этим можно объяснить выдвижение М.С. Цвета на Нобелевскую премию в 1918 г. Следующие 40 лет (1930-1970 гг.) ЖХ находит признание, ее используют в разных исследованиях, метод распространяется по разным странам, включая англоязычные. В эти годы стали разрабатываться новые виды ЖХ: тонкослойная, жидкостно-жидкостная, бумажная, аффинная (биоспецифическая), гельпроникающая, сверхкритическая флюидная. Однако из-за медленности разделения метод ЖХ практически не применялся для аналитических целей. Предложенная в 1952 г. газовая хроматография стала развиваться более интенсивно, через 3 года уже был разработан коммерческий хроматограф, через 8-10 лет метод газовой хроматографии стал одним из ведущих методов анализа смесей летучих соединений. Но газовая хроматография испытывала трудности при анализе малолетучих высокомолекулярных соединений, хотя к этому времени возросла потребность анализа таких соединений в биохимии и химии полимеров. В связи с этим вновь обратили внимание на ЖХ. Было ясно, чтобы сделать метод ЖХ экспрессным, нужно сократить пути внешней и внутренней диффузии. Для этого перешли к использованию тонкодисперсных частиц сорбента (5-10 мкм), это привело к высокому входному давлению, что потребовало разработки насосов высокого давления и приборов. Первый жидкостный хроматограф был разработан только в 1968 г. Используя колонки с зернами 5 мкм был реализован метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Следующие 50 лет (1970-2020 гг.) были периодом бурного развития ВЭЖХ: разрабатываются десятки новых жидкостных хроматографов, создаются новые современные методы ВЭЖХ (УЛЬТРАВЭЖХ, гидрофильная, высокотемпературная, высокоскоростная, хиральная, противоточная). Жидкостные хроматографы оснащаются высокочувствительными детектирующими системами, в частности, масс-спектрометрическим, диодноматричным, кулонометрическим. Эти детекторы, они позволили проводить не только количественный, но и качественный анализ, т.е. идентифицировать неизвестные компоненты в смеси. Все это позволило широко применять ВЭЖХ в жизненно важных областях (медицина, фармацевтика, экология, пища), в новых прорывных областях: метаболомика, пептидомика, фармацевтика, допинг-контроль, в судебной химии. В настоящее время ВЭЖХ - самый востребованный метод разделения и анализа.
Сорбционные и хроматографические процессы
2022. — Выпуск 3
Содержание:
Работа посвящена изучению адсорбции энантиомеров гистидина углеродными нанотрубками из водного раствора при 25°С. Для описания изотерм использованы модели Ленгмюра, БЭТ и кластерная модель адсорбции. В качестве аминокислот использованы энантиомеры гистидина производителя Sigma Aldrich, в качестве адсорбента - углеродные нанотрубки марки mkNANO MKN-SWCNT S1 (Канада). Построение изотерм осуществлено методом переменных концентраций. При этом использованы методы ультразвукового диспергирования, центрифугирования, спектрофотометрии. Изотермы имеют два плато и относятся к IV типу по классификации IUPAC. Модель Ленгмюра в области первого плато (03) и модель БЭТ для всей области концентраций 03) лишь приближенно согласуются с экспериментальной изотермой. Кластерная модель адсорбции обеспечивает очень хорошее согласование теории и эксперимента (R2=0.996 и R2=0.999). На основе модели кластерной адсорбции показано, что L- и D-гистидин сорбируются на поверхности нанотрубки в форме мономеров и кластеров размерности 13 (L-) и 9 (D-гистидин).
Ключевые слова
Большую роль в регулировании многих жизненно важных процессов в организме (психо-моторная функция, функционирование сердечно-сосудистой системы, психическое состояние) играют катехоламины, в частности, дофамин. Контроль их содержания в организме позволяет на ранних стадиях обнаружить развитие некоторых заболеваний. При этом анализ катехоламинов затруднён из-за их низкого содержания в биологических жидкостях (норма по дофамину для взрослого человека: меньше 0.13 нМ в крови, 0.3-3 мкМ в суточной моче). Для проведения определения катехоламинов необходимо их предварительное концентрирование. Цель данной работы заключалась в изучении адсорбции представителя класса катехоламинов - дофамина - на сорбентах различной природы, нахождении физико-химических характеристик адсорбции и выборе лучшего с точки зрения практики сорбента для сорбционного концентрирования катехоламинов. Проведено сравнение особенностей извлечения дофамина из водных растворов сорбентами γ-Al2O3 и Strata-SDBL в статическом режиме, изучено влияние различных параметров (рН, времени контакта фаз, концентрации дофамина) на сорбцию. Контроль за распределением дофамина в системе вода - сорбент осуществляли с использованием ОФ-ВЭЖХ с амперометрическим детектором. Наибольшая степень извлечения дофамина достигается при рН 8-9 на γ-Al2O3 и рН 5-11 на Strata-SDBL при времени сорбции 20 минут. Получены изотермы адсорбции дофамина на указанных сорбентах. Показано, что они относятся к классу изотерм Ленгмюра. Установлено, что γ-Al2O3 характеризуется значительно большей сорбционной емкость по отношению к дофамину и большей константой адсорбции, чем Strata-SDBL. Высказано предположение, что сорбция дофамина на γ-Al2O3 осуществляется преимущественно за счёт электростатических взаимодействий и водородных связей, а на Strata-SDBL - за счёт гидрофобных и π-π-взаимодействий. Для сорбционного концентрирования катехоламинов при их низких содержаниях в пробе целесообразно использовать γ-Al2O3; при этом сорбент Strata-SDBL может быть рекомендован для экспрессного концентрирования катехоламинов в динамическом режиме.
Ключевые слова
Разработка методов идентификации и количественного определения азокрасителей в продуктах питания является одной из важных тем в России из-за отсутствия надлежащего внешнего контроля за производителем. Функция контроля возложена на производителя пищевых продуктов, поэтому применение наиболее простых в исполнении методов контроля красителей таких, как тонкослойная хроматография (ТСХ), предпочтительно в условиях производства. Производители безалкогольных напитков часто используют смеси красителей, поэтому перед спектрофотометрическим определением требуется этап разделения. Одним из способов пробоподготовки в аналитической химии применяется метод тонкослойной или бумажной хроматографии, а также твердофазная экстракция (ТФЭ). Целью работы было определение азокрасителей в безалкогольных напитках методом ТСХ с применением компьютерной денситометрии. Сочетание метода ТСХ и денситометра позволяет измерять интенсивность окраски пятна красителя непосредственно на хроматограмме. Программа «ТСХ-менеджер», которая аналогична работе двухлучевого денситометра, позволяет обрабатывать графические файлы в формате jpeg. Метод ТСХ с применением компьютерной денситометрии использовали для определения концентрации азокрасителей после их экстракции из безалкогольных напитков на оксиде алюминия при рН=2. В ходе исследования установлено, что экстракция азокрасителей оксидом алюминия при рН 2 позволяет селективно извлекать их из водных растворов при полноте сорбции >92%. Преимущественно процесс сорбции реализуется путем электростатического взаимодействия между бренстедовскими катионными центрами оксида алюминия и анионными формами азокрасителей, что подтверждается методом ИК-спектроскопии. Данная методика апробирована при определении красителей в безалкогольных напитках «Любимый», «Добрый», «Фритти Лайт Тропик», «Фрутмотив», в которых обнаружены: тартразин Е102, желтый «Солнечный закат» Е110, азорубин Е122, не заявленные в составе напитков. Содержание азокрасителей в некоторых напитках превысило максимально допустимый уровень. Метод ТСХ с применением ТФЭ и компьютерной денситометрии позволяют проводить определение азокрасителей с высокой селективностью, чувствительностью. Поэтому данный метод можно применять при контроле качества безалкогольных напитков.
Ключевые слова
Работа объединяет результаты оценки сорбционных свойств твердотельной фазы оксида европия малых масс. Методом прямого пьезокварцевого микровзвешивания изучены особенности сорбции паров индивидуальных летучих органических соединений различных классов на потенциально обладающей люминесцентными свойствами микрофазе Eu2O3-SiO2 малой массы (от 0.3 до 2.2 мкг). Изучены особенности сорбции паров в зависимости от массы покрытия. Показано, что покрытия меньше 1 мкг характеризуются малой эффективностью сорбции веществ и их применение нецелесообразно. Кроме того, малые массы фазы не позволяют получить сплошное покрытие и не могут применяться для изготовления сенсоров. Сенсорами с большей массой фазы Eu2O3-SiO2 возможно обнаружение паров кетонов C3-C4, спиртов C3-C4, ацетальдегида, метанамина, бутоксибутана-1 и бутановой кислоты. Для нахождения качественных параметров для распознавания веществ в смесях применяли разные алгоритмы обработки выходных кривых сенсоров с разными массами оксида европия. Наиболее информативными являются кинетические параметры, отражающие изменение скорости сорбции паров в разных временных интервалах нагрузки сенсора парами. По кинетическим параметрам сорбции, рассчитанным по нормированным хроночастотограммам сенсоров, осуществима идентификация метанамина (Cmin=3.1 мг/дм3) на фоне паров воды (Cmin=1.7 мг/дм3). Алифатические амины отличаются от других паров специфической сорбцией на фазе. С увеличением времени детектирования сигнал сенсоров в парах этого вещества постоянно растет длительное время. Это позволяет снизить чувствительность пьезосенсора с покрытием Eu2O3-SiO2 при увеличении времени накопления паров метанамина из реальных проб. Оценили пределы обнаружения и определения метанамина и других изученных паров в оптимальных условиях сорбции и на выделенных фазах сорбента. Данные сопоставлены с литературными данными для определения метанамина в биопробах для решения задач клинической диагностики. Сорбционные и потенциально люминесцентные свойства расширяют возможности применения наночастиц Eu2O3-SiO2 для диагностика биопроб с видимым эффектом реакции на аналит. Однако чувствительность пьезосенсоров на основе наночастиц оксида европия превышает чувствительность люминесценции этой фазы.
Ключевые слова
Важными фенольными (ФЛ) загрязнителями вод являются хлорфенолы и алкилфенолы. Нормативные требования к мониторингу ФЛ (определение аналитов на уровне мкг/дм3) обусловили необходимость разработки многочисленных методов концентрирования ФЛ из водных сред. Для повышения селективности определения и извлечения аналитов активно применяются молекулярно-импринтированные полимеры (МИП). Работа является продолжением исследований коллектива авторов. Для увеличения селективности определения аналитов и уменьшения расхода растворителя синтезированы магнитные МИП. Предварительно изучена возможность получения магнитного сорбента с МИП, где в качестве функционального мономера применен N-винилпирролидон (НВП), сшивающий агент - этиленгликольдиметакрилат, а в качестве молекул-темплатов - фенолы (2-хлорфенол, 4-хлорфенол, 2-нитрофенол, 4-нитрофенол, бисфенол-А, п-трет-бутилфенол, нонилфенол, трет-нонилфенол, 4-октилфенол) и его изомеры. Установлены оптимальные условия сорбции (масса сорбента - 10 мг, объем раствора - 10 см3, рН 2, время достижения сорбционного равновесия - 30 мин). В таких условиях получены изотермы сорбции и проведена оценка сорбционной способности изучаемых МИП по отношению к ФЛ. Изотермы сорбции обрабатывали с помощью уравнений сорбции Ленгмюра и Фрейндлиха. Наибольшие коэффициенты корреляции (r2 0.982-0.998) установлены при их представлении в координатах Ленгмюра при этом предельная сорбция изученных ФЛ варьируется в пределах от 108.7-250.0 мг/г. Также в работе проведена оценка селективности предварительно полученных магнитных молекулярно-импринтированных полимеров на основе N-винилпирролидона с отпечатками конкретного фенола к другим соединениям фенольного ряда. Коэффициенты селективности полимера с молекулярными отпечатками 2-хлорфенола (МИП-2ХФ) по отношению к остальным фенолам невелики и изменяются в интервале 0.7-1.1. МИП-4НФ характеризуется очень высокими показателями селективности в отношении всех фенолов (k= 11-30), причем максимальный коэффициент k установлен по отношению к 2-НФ. Установлено, что коэффициенты селективности и предельная сорбция зависят от гидрофобности, которая оценивается коэффициентами Г анча-Лео (lgP), значений констант кислотной диссоциации (рКа) и наличием различных заместителей в ароматическом ядре ФЛ.
Ключевые слова
Фармакологический эффект листьев облепихи крушиновидной определяется богатым составом биологически активных веществ (БАВ): водо- и жирорастворимые витамины (группа В, С и Е), полифенолы (дубильные вещества и флавоноиды), жирные и органические кислоты (оксикоричные и аминокислоты), каротиноиды (каротины и ксантофиллы) и хлорофиллы. Содержание хлорофиллов и каротиноидов, по разным данным, составляет 160-760 мг% и 35-150 мг% соответственно. Разделением и идентификацией желтых и зеленых пигментов в составе метаболома листьев облепихи методом ТСХ до настоящего времени не занимались. Интересным является также исследование закономерностей накопления данных БАВ листьями в процессе роста и развития - в разных фенологических фазах растения, что необходимо для научного обоснования сроков заготовки листьев облепихи с целью использования в фармации и дальнейшей разработки лекарственных растительных препаратов (ЛРП) на их основе. Целью исследования являлось обоснование выбора условий хроматографического разделения пигментов (каротиноидов и хлорофиллов) листьев облепихи крушиновидной методом ТСХ и изучение их состава на различных сроках заготовки. В качестве объекта исследования использовали листья облепихи крушиновидной, заготовленные от дикорастущих растений на территории Воронежской области в три этапа развития: 1 фаза - в середине июня; 2 фаза - вторая половина июля; 3 фаза - конец августа - начало сентября 2021 года. Картина разделения для спиртовых, ацетоновых и этилацетатных вытяжек имела одинаковый характер, так как данные растворители способны извлекать как полярные ксантофиллы, так и малополярные каротины и хлорофиллы. Г ексановые же экстракты содержали более бедный состав пигментов. Лучшей подвижной фазой по совокупности изученных параметров эффективности хроматографического процесса является система петролейный эфир-этанол (16:1) при использовании пластин типа ПТСХ-П-В. Таким образом, подобраны оптимальные условия разделения пигментов листьев облепихи крушиновидной в тонком слое сорбента. Полученные виды двумерных и одномерных хроматографических профилей пигментов листьев позволили установить наличие 6 БАВ хлорофилловой природы, в т.ч. хлорофиллы а, b и феофитин, и 5 БАВ пигментов группы каротиноидов (Р-каротин и ксантофиллы). С точки зрения разнообразия качественного состава и количественного содержания желтых и зеленых пигментов, а, следовательно, ценности для фармации как потенциального сырья для получения ЛРП, могут быть рекомендованы листья, заготовленные в фазу 3.
Ключевые слова
В аналитической практике газовой хроматографии адсорбенты на основе диоксида кремния находят широкое применение в целях разделения и концентрирования смесей органических соединений различного состава. Для решения конкретных задач необходимо получать новые сорбционные материалы с закрепленными функциональными группами, слоями или элементами, путем варьирования которых меняется число и типы адсорбционных центров исходных кремнеземов. В качестве перспективных модифицирующих добавок, представляющих особый интерес, применяют хелатные комплексы переходных металлов, в том числе импрегнированных в виде адсорбционных слоев. В данной работе получены и исследованы физико-химическими методами кремнеземы на основе Силохрома С-80, модифицированного ализаринатами никеля, меди и кобальта. Термическим анализом установлено, что ализаринат меди устойчив до 300°С, ализаринаты никеля и кобальта - до 280°С. С помощью адсорбционной порометрии показано, что модифицирование кремнезема приводит к снижению средних диаметров и суммарных объемов пор, площадей удельной поверхности от 84 до 76 м²/г. Методами ИК-и КР-спектроскопии доказано закрепление хелатов на поверхности SiO2. Газохроматографическим методом изучены процессы адсорбции органических соединений (н-алканов, нитрометана, гептена-1, ароматических углеводородов, кетонов и спиртов), способных к различным типам межмолекулярных взаимодействий. Импрегнирование SiO2 ализаринсодержащими хелатами приводит к изменению констант Генри адсорбции при варьировании иона металла в составе комплекса в ряду Ni2+˂Co2+˂Cu2+, теплоты и энтропии адсорбции по отношению ко всем сорбатам. Нанесение комплексных соединений на поверхность Силохрома С-80 способствует изменению вкладов специфических взаимодействий в теплоту адсорбции. При этом наибольшие значения Δq̅dif,1(спец) характерны для органических соединений, склонных к донорно-акцепторному и π- комплексообразованию. Согласно анализу компенсационных термодинамических зависимостей q̅dif,1 - ΔS̅S1,c показано, что энтропия является определяющим термодинамическим параметром при адсорбции тестовых соединений на поверхности исследуемых хроматографических материалов.
Ключевые слова
Селективность при хроматографировании и ионном обмене органических веществ определяется во многих случаях рефрактометрическими и объемными свойствами растворов. Поэтому изучение закономерностей изменения данных свойств при варьировании температуры, молярной массы и концентрации компонентов имеет важное прикладное значение. В работе изучены зависимости мольных объемов и рефракций бинарных смесей, образованных общим компонентом н-пропанолом с первыми пятью представителями гомологического ряда н-алкилэтаноа-тов от температуры и молярной массы второго компонента. Установлены положительные отклонения от правила аддитивности для изотерм плотности двухкомпонентных растворов. Причем их величина возрастает с увеличением молекулярной массы н-алкилэтаноата в гомологическом ряду. Рассчитанные для этих растворов величины мольных объемов линейно связаны с мольной долей, молярной массой н-алкилэтаноата в смеси и температурой системы. Предложены уравнения, позволяющие рассчитывать мольный объём растворов систем с точностью 0.02 см3/моль в интервале температур. Корреляционным анализом установлено, что для растворов постоянных концентраций мольные объёмы смесей аддитивно возрастают с увеличением молярной массы н-алкилэтаноата и линейно зависят от мольной доли н-пропанола в смеси. С учетом перечисленных закономерностей предложено обобщающее уравнение, нормирующее вклад в значение Vm всех параметров (х, М, Т). Изотермы показателя преломления растворов плавно возрастают с увеличением концентрации и молярной массы н-алкилэтаноата в смеси. Температурный градиент растворов практически не зависит от состава и составляет 0.0003 град-1. Рассчитанные значения мольных рефракций растворов линейно возрастают с увеличением концентрации и молярной массы сложного эфира в смеси. Получены соотношения Rm=f(x) для исследованных систем и предложено уравнение, обобщающее вклад мольной доли и молярной массы эфира в значение мольной рефракции. Предложенные в работе уравнения, позволяют прогнозировать физико-химические свойства растворов во всем диапазоне концентраций и могут использоваться для расчета свойств многокомпонентных систем, для оперативного контроля процессов производства алифатических спиртов и н-алкилэтаноатов, а также для определения селективности поглощения сорбентами молекул и ионов минерального и органического сырья.
Ключевые слова
Целью работы было получение с помощью хроматографических методов гомогенных изоферментов аконитатгидратазы (аконитаза, АГ, КФ 4.2.1.3), локализованных в митохондриях и цитоплазме гепатоцитов крыс, и изучение их физико-химических и каталитических свойств. Активность аконитазы определяли спектрофотометрически (при 240 нм). Для получения гомогенных препаратов АГ фермент очищали с использованием хроматографических способов, включающих на несколько этапов (высаливание гомогената сульфатом аммония, обессоливание или гель-фильтрация через сефадекс G-25 и ионообменная хроматография на ДЭАЭ-Тоуореай и гель-хроматография на сефадексе G-200). Чистоту выделенных ферментных препаратов оценивали с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Белок в пробах измеряли по Лоури. Величину молекулярной массы АГ определяли методом денатурирующего электрофореза по Лэммли. Универсальное окрашивание белков проводили нитратом серебра. С целью подтверждения соответствия выделенных белков изоферментам аконитатгидратазы параллельно осуществляли специфическое проявление геля тетразолиевым методом с добавлением НАФД-изоцитратдегидрогеназы (НАДФ-ИДГ) в качестве вспомогательного фермента. Применение хроматографических методов для очистки АГ из печени крыс Rattus norvegicus линии Wistar позволило получить гомогенные ферментативные препараты аконитатгидратазы с удельной активностью цитозольной формы - 1.736±0.024 Е/мг белка, а митохондриальной- 1.256±0.018 Е/мг белка, которые были использованы для исследования физико-химических и кинетических характеристик. Значения молекулярной массы цитоплазматической АГ из гепатоцитов крыс составили 91±5.2 кДа, а митохондриальной - 81±4.1 кДа. Выявлено, что обе формы аконитазы являются гомодимерами. Величина молекулярной массы (Mr ) субъединиц составляет 45 кДа для цитоплазматической фракции и 41 кДа - для АГ из митохондрий. Показано, что кинетические характеристики ферментативной реакции, которые катализируют цитоплазматический и митохондриальный изоферменты аконитатгидратазы, подчиняются уравнению Михаэлиса-Ментен. Установлено, что аконитаза имеет большее сродство к цисаконитату, чем к цитрату. Показано, что изофермент из цитоплазмы имел рН оптимум 8.0±0.1, то есть находился в щелочной области по сравнению с АГ из митохондрий (7.4±0.1).
Ключевые слова
В настоящее время вопрос восстановления окружающей среды от загрязнения, вызванного процессами добычи, переработки и транспортировки нефти является актуальным по всему миру. Особое значение приобретает ремедиация загрязненной территории не только от нефтепродуктов, но и от тяжелых металлов (ТМ), поскольку они в больших количествах поступают на почвенный покров в результате попутного сжигания нефтяного газа. В связи с этим исследование гранулометрического состава почвы приобретает все большую актуальность, поскольку данный параметр определяет их сорбционные свойства, тем самым влияет на миграцию загрязняющих веществ в сопредельные среды. Цель работы: изучение сорбционной способности почв Ирака (имеющих различный гранулометрический состав) к нефтепродуктам, валовому содержанию и подвижным соединениям ТМ (Pb, Cd, Ni, Cu, Zn, Mn) на различном расстоянии от предприятий по добыче и переработке нефти и установок, сопровождающих нефтедобычу. Объектом исследования были почвы северной части Ирака (арениковые кальцисоли Кайяра и кальциковые вертисоли Таук), имеющие различный гранулометрический состав. Образцы отбирались в районе действия предприятий по нефтедобыче и нефтепереработке в 2021 году, на различном расстоянии от нефтяного разлива и факельных установок. Согласно полученным данным отмечается накопление нефтепродуктов, валового содержания и подвижных соединений ТМ относительно фонового участка, не подверженного какому-либо антропогенному загрязнению. Кальциковые вертисоли, имеющие тяжелый гранулометрический состав, обладают более высокой сорбционной способностью к изучаемым загрязнителям. Повышенная сорбционная способность приводит к накоплению загрязнителей на поверхности почв и их возможно удалять механически. Что касается арениковых кальцисолей, то за счет облегченного гранулометрического состава загрязнители способны интенсивно мигрировать вниз по почвенному профилю, поступая в сопредельные среды. Постоянное наличие пыльных бурь в районе исследования способствует миграции токсикантов на значительные расстояния от источника загрязнения, что приводит к возникновению вторичных очагов загрязнения территории.
Ключевые слова
Бромелин - протеолитический фермент, который нашел применение в медицине и промышленности. Однако использование свободных форм ферментов имеет свои недостатки, такие как их нестабильность к изменяющимся условиям среды, трудоёмкость и сложность отделения от исходных реагентов и продуктов реакции после завершения процесса. Решить эту проблему можно с помощью иммобилизации бромелина на полисахаридах. В связи с вышесказанным, цель исследования заключалась в разработке методики сорбционной иммобилизации бромелина на N-малеоилхитозане с различными молекулярными массами и изучении структурных особенностей полученных комплексов. Осуществлен синтез N-малеоилхитозана с различными молекулярными массами и степенями замещения. Предложена методика проведения сорбционной иммобилизации бромелина на N-малеоилхитозане. Взаимодействие между носителем и ферментом изучено методами ИК-спектроскопии и гибкого молекулярного докинга, выявлены функциональные группы полисахарида и аминокислоты поверхности глобул бромелина, принимающие участие в образовании комплекса. Измерение содержания белка в иммобилизованных препаратах бромелина проводили по модифицированному методу Лоури, протеазную активность образцов определяли на субстрате - азоказеине. Показано, что взаимодействие бромелина и N-малеоилхитозана обусловлено электростатическими и гидрофобными взаимодействиями, а также образованием водородных связей между компонентами. Связи и взаимодействия с N-малеоилхитозаном образуются в том числе с участием аминокислотных остатков, составляющих активный центр энзима (Cys26 и His158), что отражается на протеолитической активности получаемых препаратов. Установлено, что оптимальное соотношение содержания белка (мг на г носителя), общей активности (в ед на мл раствора) и удельной активности (в ед на мг белка) достигается в случае использования в качестве матрицы-носителя N-малеоилхитозана с молекулярной массой 200 кДа. Полученные препараты бромелина, иммобилизованного на N-малеоилхитозане, могут стать основой для решения ряда проблем в биомедицине, возникающих при создании препаратов бактерицидного, противоотечного, антитромбического и противовирусного действий. Благодаря сочетанию относительно недорогих компонентов предлагаемый нами метод доступен для отечественных лабораторий и перспективен для дальнейшего применения в промышленности.
Ключевые слова